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zwjbeijing

铁杆木虫 (正式写手)

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专业: 免疫生物学

[求助] pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST 慢病毒表达体系原理

最近老板在公司让别人包装慢病毒，筛选稳转株，用的是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST载体，想请教大侠们这个实验的具体原理（附带质粒图谱）：
attR1 和attR2是干什么用的？
包装成病毒，还需要什么样的质粒？
病毒里面的遗传物质RNA，是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST载体的那一部分？
在感染宿主细胞的时候，是通过什么位点或者机制整合到染色体上的？
先谢谢大侠们了我找了好久了都没有搞定，给一篇介绍的文献也可以的 ~~~~(>_<

~~~~

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1楼2012-05-28 23:19:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yqbter

至尊木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zwjbeijing: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-05-29 22:33:15

它不是attR而是attB。是Gateway系统的识别序列。可以方便的替换两个attB之间的序列，而不用考虑酶切位点之类的麻烦事。见维基：http://en.wikipedia.org/wiki/Gateway_Technology7 i- `5 G; m: {6 Q
包成病毒还要pLP1、pLP2、pLP/VSVG 见http://www.stemcell8.cn/thread-52928-1-1.html
6 M( k. y" L. c% N/ ~" R# a7 m是从5‘LTR到3’LTR中间这一段。
6 R* q/ R: p2 _1 D4 V7 M- d机制不知道。, ^# j8