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zwjbeijing铁杆木虫 (正式写手)
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pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST 慢病毒表达体系原理
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最近老板在公司让别人包装慢病毒，筛选稳转株，用的是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST载体，想请教大侠们 这个实验的具体原理（附带质粒图谱）： attR1 和attR2是干什么用的？ 包装成病毒，还需要什么样的质粒？ 病毒里面的遗传物质RNA，是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST载体的那一部分？ 在感染宿主细胞的时候，是通过什么位点或者机制整合到染色体上的？ 先谢谢大侠们了 我找了好久了都没有搞定，给一篇介绍的文献也可以的 ~~~~(>_<  ~~~~   |
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【答案】应助回帖
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它不是attR而是attB。是Gateway系统的识别序列。可以方便的替换两个attB之间的序列，而不用考虑酶切位点之类的麻烦事。见维基：http://en.wikipedia.org/wiki/Gateway_Technology7 i- `5 G; m: {6 Q 包成病毒还要pLP1、pLP2、pLP/VSVG 见http://www.stemcell8.cn/thread-52928-1-1.html 6 M( k. y" L. c% N/ ~" R# a7 m是从5‘LTR到3’LTR中间这一段。 6 R* q/ R: p2 _1 D4 V7 M- d机制不知道。, ^# j8 |
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