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cecilia533新虫 (小有名气)
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大肠杆菌周质空间蛋白的提取
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我使用分子克隆手册上的方法提取周质空间蛋白 即菌体加100微升细胞裂解液冰浴10min,离心得上清即为周质空间蛋白。 其中细胞裂解液是： 1mg/ml lysozyme, 20% sucrose , 30mmol/l Tris-Cl(pH8.0), 1mM EDTA. 另外还用渗透压休克法：菌体加100微升20%蔗糖30mMTris-Cl(pH8.0),1mM EDTA.冰浴30min,离心得菌体，加100微升30mMTris-Cl(pH8.0),30min后离心得上清（周质空间蛋白） 这两种方法都能把阴性对照中（也许是胞内蛋白）提取出来，请问提周质空间蛋白的关键是什么，为什么阴性对照我每次都能提出来蛋白来呢？有没有什么好的提取方法？ |
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2楼2017-02-10 21:48:00