24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2677  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主

[求助] 请教如何判断aptamer是否有效?

大家好,我最近做一个关于aptamer的实验,是用纳米粒子对荧光修饰的aptamer的荧光淬灭,然后在分析物存在下荧光回复。
但是试验中,增加分析物浓度也始终不能使荧光回复,不知道问题所在。我怀疑是我的aptamer有问题,不知道大家有没有什么好方法验证到手的FAM-aptamer的序列正确性 ?
我的aptamer是上海生工合成的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

我有什么能帮助您的吗?
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主

引用回帖:
20楼: Originally posted by twwin123 at 2013-04-24 15:44:12
你的实验原理和方法的想法度不错,有几个问题想问一下:1.你的适体的解离常数是多少?2.你做过适体的淬灭常数么?如果这两个问题都清楚了,那有可能是其他原因。一般情况下,你的想法应该是可以行的!如果上述两个问 ...

谢谢回复!不过,有点太晚了吧。。。
我有什么能帮助您的吗?
21楼2013-04-24 15:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

sally208

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
padodo: 金币+10, ★★★很有帮助, 呵呵,你要是在国内,我就一个电话打过来问你了^.^ 2012-05-23 08:56:08
有否可能aptamer与分析物结合后仍吸附在纳米粒子表面,这样的话荧光没有恢复就能理解了。
此外,我没理解错的话,你这个sensor的设计前提在于aptamer能吸附在纳米粒子表面,从而导致荧光淬灭,对此有否实验证明?如果不是static quenching, 而是碰撞引起的dynamic quenching,嘿嘿,你也得考虑一下了。
2楼2012-05-23 05:04:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
padodo: 金币+3, 有帮助, 谢谢! 2012-05-23 08:56:20
适配子与分析物结合后,可能还吸附在粒子表面。
蓝精灵
3楼2012-05-23 06:36:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主

引用回帖:
2楼: Originally posted by sally208 at 2012-05-23 05:04:50:
有否可能aptamer与分析物结合后仍吸附在纳米粒子表面,这样的话荧光没有恢复就能理解了。
此外,我没理解错的话,你这个sensor的设计前提在于aptamer能吸附在纳米粒子表面,从而导致荧光淬灭,对此有否实验证明?如

sally兄,你说的这个情况我也是考虑着,如果是你那种荧光内滤导致的淬灭,那就不会有荧光恢复了。
问题在于我只是重复了一个文献(JACS)的实验,但是做不出他的现象。。。
我有什么能帮助您的吗?
4楼2012-05-23 08:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见