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iven308

银虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看下细胞长成这样什么原因

最近复苏了MC3T3-E1细胞,采用α-MEM培养基,复苏后细胞逐渐长成了下面图片里的模样,这是啥原因?



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修行在个人
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)

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lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-23 08:51:59
好像是正常的吧,再多培养几天看看。
BY THE WAY 我们实验室用的α-MEM+10%SERUM
2楼2012-05-23 01:10:59
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tanyanfei

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-23 08:52:05
更换新购买的培养基和血清,尤其是血清。初始复苏细胞时添加的血清浓度到15%--20%,如果复苏出来的细胞还是这样的,那么基本上就可以确定是冻存的细胞有问题。
3楼2012-05-23 08:44:15
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wolvesdancer

铁杆木虫 (正式写手)

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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流,欢迎常来生物材料版 2012-05-23 09:52:19
同意楼上,血清很重要,最好用FBS,另外注意以下pH的问题
4楼2012-05-23 09:14:42
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iven308

银虫 (小有名气)

如果复苏时分到培养皿中的细胞量少了是不是会导致细胞的拉长变形,变成蜘蛛网类似的形状啊?
修行在个人
5楼2012-05-23 13:59:29
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-23 15:11:56
我没有养过这个细胞株,但是我养的别的细胞株多次遇到过这个情况。我的解决办法是,传代时,胰酶消化后,离心管离心,并再用PBS离心洗一次,再传的密一点,长两天就好了。我怀疑是细胞状态不好,培养介质中的细胞坏死因子比较多,抑制了细胞的增殖。而一般的PBS冲洗难以洗净细胞坏死因子造成的。
6楼2012-05-23 15:00:41
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