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821078607

银虫 (小有名气)

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[求助] RNA电泳

各位高手大家好，新手在此请教几个问题, 希望各位不吝赐教
请问我从细胞中提取出来的RNA经反转录用于后续PCR，要确定它的完整性，除了测OD值还要进行电泳表征吗？
另外，测吸收时全部都要用DECP水吗？一定要用甲醛变性琼脂糖凝胶电泳吗，所有电泳时的溶液包括电泳缓冲夜、载样液等都要用DECP水吗，电泳槽要经特殊处理吗？
我测RNAOD值时用普通二次水稀释后，测其OD值为1.875，是不是说明只测吸收不能说明RNA的完整性？
先谢谢大家！

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1楼 2012-05-20 13:19:12

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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

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【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流哦 2012-05-23 14:04:51

我提RNA摸索了近两个月，现在算很顺利了。其实只要提取的时候小心一点，跑电泳的时候同新配制的TBE做电泳液，150v泡20min就行了。跑电泳的时候可以买专用的RNAloading buffer。跑出来条带会很好看。电泳条带很好就不用测OD值了。电泳条带上游明显的基因组污染的话果断重新提取，每次提取不要贪心，提4个样品左右为宜，太多的话提的不好。

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开开心心做科研，踏踏实实做好人。

8楼2012-05-22 22:42:26

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