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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？
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dearesthebe

铜虫 (初入文坛)
是不是PCR的程序没有设定好？
我做菌落PCR的程序都是先95℃预变性，适当提高这个温度可以使菌体充分裂解
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11楼2012-05-21 17:04:34
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)
可能跟你的扩增程序有关，你的预变性时间可以适当延长，保证E. coli能充分裂解，这样保证DNA能够进入扩增体系。
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12楼2012-05-27 10:08:26
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guaitutu

新虫 (小有名气)
最近我也纠结于其中，楼上所说的PCR前预变性的方法也试过了，还是不行，条带忽而出忽而不出，无重复性，准备提质粒做做看
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13楼2012-11-29 19:23:45
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bailihu01

禁虫 (小有名气)
送红花一朵
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14楼2013-06-10 15:01:21
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)
我现在就在纠结这些东西，我想的是自己破壁的问题，我做的是酵母菌落PCR，准备提取基因组来进行验证，如果有的话就表明自己做的是对的了。
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加油，天道酬勤
15楼2014-10-27 20:18:23
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gayy1990602

铜虫 (初入文坛)
首先，菌液PCR时你的同时做阳性对照，看是不是体系问题，第二，有可能假阳性也有可能。
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16楼2015-01-26 11:17:11
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苏蛋9966

银虫 (小有名气)
我们做菌液pcr也很奇怪 我连做两次没条带，我师姐就做出来了，有时候我做出来我师姐做不出来，我们是10ul体系
而且我们菌从没做破菌处理，直接pcr
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17楼2015-04-14 15:56:45
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