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dearesthebe

铜虫 (初入文坛)

是不是PCR的程序没有设定好?
我做菌落PCR的程序都是先95℃预变性,适当提高这个温度可以使菌体充分裂解
11楼2012-05-21 17:04:34
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xinongfish

铁杆木虫 (著名写手)

可能跟你的扩增程序有关,你的预变性时间可以适当延长,保证E. coli能充分裂解,这样保证DNA能够进入扩增体系。
12楼2012-05-27 10:08:26
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guaitutu

新虫 (小有名气)

最近我也纠结于其中,楼上所说的PCR前预变性的方法也试过了,还是不行,条带忽而出忽而不出,无重复性,准备提质粒做做看
13楼2012-11-29 19:23:45
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bailihu01

禁虫 (小有名气)

送红花一朵
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14楼2013-06-10 15:01:21
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)

我现在就在纠结这些东西,我想的是自己破壁的问题,我做的是酵母菌落PCR,准备提取基因组来进行验证,如果有的话就表明自己做的是对的了。
加油,天道酬勤
15楼2014-10-27 20:18:23
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gayy1990602

铜虫 (初入文坛)

首先,菌液PCR时你的同时做阳性对照,看是不是体系问题,第二,有可能假阳性也有可能。
16楼2015-01-26 11:17:11
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苏蛋9966

银虫 (小有名气)

我们做菌液pcr也很奇怪 我连做两次没条带,我师姐就做出来了,有时候我做出来我师姐做不出来,我们是10ul体系
而且我们菌从没做破菌处理,直接pcr
17楼2015-04-14 15:56:45
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