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dshlove

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by guojj at 2012-05-22 10:26:39:
谢谢回复,我刚定了T啊TaKaRa的Prime STAR DNA聚合酶,不知效果如何。
引物我决定重新设计的,但是你说的“找出相对应的序列,上面有活性位点的区域标识,你把你的跨膜区表达蛋白序列区间去比对,看是不是在活性区

就以uniport中为准吧,你打开特定编号蛋白,找到Sequence annotation (Features)一栏中,Sites一列就有Active site就是指活性位点。再看看你要去除的跨膜区蛋白表达基因是不是包含有活性位点。
互相交流啊。
11楼2012-05-22 12:49:52
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dshlove

木虫 (正式写手)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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7楼: Originally posted by dshlove at 2012-05-22 09:08:13:
因为我最近在做肠激酶,所以给你说说我的想法。
第一个问题:你首先要确定你的蛋白,去NCBI或者uniport,找出相对应的序列,上面有活性位点的区域标识,你把你的跨膜区表达蛋白序列区间去比对,看是不是在活性区间

补充点,谢谢,管理员给我指正了失误。
12楼2012-05-22 13:13:24
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丫头7976

铜虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by guojj at 2012-05-20 13:24:31:
谢谢回复。请推荐一种高保真的pcr酶。我们一直用TaRaKa的ExTaq酶,但对于2000bp好像有突变啊。

我也用的这个酶 那就是你运气不好 再多选几个测序吧 宝生物还有一款高保真的 不过我没用过 你再查查
13楼2012-05-24 08:19:23
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guojj

铁虫 (初入文坛)

谢谢回复,现在我已经成功连上T载体了。现在做与PET-28a 的连接。请问大家测过蛋白激酶的活性吗?有试剂盒可以够买吗?
谢谢回复
14楼2012-08-02 13:04:51
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我最近在做酵母的跨膜蛋白,实验室以前没有人做过,我想问一下,我应该怎样将酵母中的跨膜蛋白敲除啊?因为我这个跨膜蛋白是6次跨膜的,我应该怎样操作啊?
15楼2013-01-20 17:12:51
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