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wangzhiwei6858

金虫 (小有名气)

[求助] 藻细胞破碎问题

目前正在摸索测定藻细胞的酶活,有几个问题想求助一下?
首先就是藻细胞的收集,离心方法存在藻细胞损失很大的问题,滤膜过滤可以解决藻细胞损失的问题,
但是过滤后,藻细胞破碎就出问题了,有滤膜存在超声破碎效果不好(其实没有滤膜感觉超声破碎的效果也一般啊,我是用300w,超5s,停5s,一共超5min),要是研磨的话一是效率低,研磨是不是藻细胞损失也很大,5ml提取液也不能把匀浆都洗出来啊?
各位高手你们都是怎么提取酶的啊?不存在我上面的问题吗,请问怎么解决,或是说明一下合理性,谢谢了!
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jj2120653

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励回答 2012-05-16 18:15:43
首先你要清楚酶活的定义。。。藻细胞的损失其实没关系的,要测蛋白,是已单位蛋白定义酶活的。。。很多SCI文章都有。。可以看看
藻儿为啥这样绿
2楼2012-05-16 17:32:06
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wangzhiwei6858

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jj2120653 at 2012-05-16 17:32:06:
首先你要清楚酶活的定义。。。藻细胞的损失其实没关系的,要测蛋白,是已单位蛋白定义酶活的。。。很多SCI文章都有。。可以看看

这个我懂,就是用测的值除以蛋白,得到单位蛋白的酶活。可是损失大了我的浓度就过低了,导致测不出来。请问你们是用什么方法收集藻细胞和破碎的?
3楼2012-05-16 17:57:36
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jj2120653

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wangzhiwei6858 at 2012-05-16 17:57:36
这个我懂,就是用测的值除以蛋白,得到单位蛋白的酶活。可是损失大了我的浓度就过低了,导致测不出来。请问你们是用什么方法收集藻细胞和破碎的?...

离心收集再研磨。。
藻儿为啥这样绿
4楼2012-12-19 17:01:51
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木木舟

新虫 (正式写手)

楼主做出来了吗  我也在做这个,可以相互讨论一下
5楼2016-05-30 13:23:26
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