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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

[求助] 抑菌圈有内外两层,里层不透明,外层透明是怎么回事

我最近在做大肠杆菌的抑菌试验,用的是最常见的LB培养基,但是我发现,最后的结果都是在牛津杯外面有不透明的圈,再外面还有一层透明的圈,不知道是怎么回事,请高手指教~感激不尽!
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xxnly

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
飞鱼1112: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-05-11 13:06:56
首先应该确定一下牛津杯周围那一圈不透明的到底什么,是大肠杆菌还是其他杂菌,还是你的物质本身与培养基结合在一起就成了那个不透明的圈。
个人认为可以借助革兰氏染色先观察一下(是菌的话应该会比较容易刮下来)。。如果菌体形态及颜色与大肠杆菌一致,那么可以认为不透明的是大肠杆菌。因为有些抑菌物质是在一定的浓度下才起到抑制作用的,超过这个浓度,即使浓度很大,抑菌效果都不明显。如果那圈不透明的是大肠杆菌的话,刚好说明了这种情况,牛津杯中心的浓度是最高的,可能抑菌活性不好,往外的部分随着浓度的降低,抑菌活性提高。。。。但是如果那一圈是杂菌的话,那有可能是样品所带进去的杂菌在培养基上生长了,这种情况可能需要在上样前对样品最个除菌处理。。
如果上述两种情况都不是,那就可能你的样品与培养基结合之后就那个样子?
其他的原因我就想不到了。
这只是我个人的分析,毕竟我的能力有限,不知道分析的是不是正确,建议你再问问其他比较懂这个的同学或者老师。万一我分析错了误导了你,也实在是过意不去O(∩_∩)O~~
啊!我要毕业了……天!赐我一份工作吧!
5楼2012-05-11 12:29:29
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普通回帖

xxnly

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没看到你的图片,只能是推测:牛津杯外面不透明的圈会不会是你的样品带进去的菌在培养基上生长了吧,或者可能是牛津杯上面污染的菌。外面的透明圈才是你真正想要的圈吧。所以做实验的时候一般一定要确保牛津杯经过无菌处理,而且样品也要经过除菌处理。
啊!我要毕业了……天!赐我一份工作吧!
2楼2012-05-10 14:59:28
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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xxnly at 2012-05-10 14:59:28:
没看到你的图片,只能是推测:牛津杯外面不透明的圈会不会是你的样品带进去的菌在培养基上生长了吧,或者可能是牛津杯上面污染的菌。外面的透明圈才是你真正想要的圈吧。所以做实验的时候一般一定要确保牛津杯经过 ...

我的牛津杯是放在培养皿里去湿热灭菌的,我把照片上传,请你帮我看下~谢谢
3楼2012-05-11 11:12:03
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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

这是照片,每个圈都有两层。。。


4楼2012-05-11 11:15:13
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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xxnly at 2012-05-11 12:29:29:
首先应该确定一下牛津杯周围那一圈不透明的到底什么,是大肠杆菌还是其他杂菌,还是你的物质本身与培养基结合在一起就成了那个不透明的圈。
个人认为可以借助革兰氏染色先观察一下(是菌的话应该会比较容易刮下来 ...

很感谢,你的分析对我很有启发,我自己的估计是牛津杯染菌,是外界引入的杂菌,保险起见,我先检测下是不是大肠杆菌为好~~哈哈,再次谢谢啦~
6楼2012-05-11 13:05:53
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wcs0313

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xxnly at 2012-05-11 12:29:29:
首先应该确定一下牛津杯周围那一圈不透明的到底什么,是大肠杆菌还是其他杂菌,还是你的物质本身与培养基结合在一起就成了那个不透明的圈。
个人认为可以借助革兰氏染色先观察一下(是菌的话应该会比较容易刮下来 ...

弱弱的发表一下我的看法,我认为这个里层的应该是大肠杆菌。我也遇到过类似的情况,不过的测活性的时候一般用的是滤纸片,有的时候在滤纸片的四周有很浓厚的菌生长,但是往外有很明显的抑菌圈。
我们组的分析是,可能样品里面有一部分物质是细菌非常喜欢的。
7楼2012-05-13 04:21:06
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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wcs0313 at 2012-05-13 04:21:06:
弱弱的发表一下我的看法,我认为这个里层的应该是大肠杆菌。我也遇到过类似的情况,不过的测活性的时候一般用的是滤纸片,有的时候在滤纸片的四周有很浓厚的菌生长,但是往外有很明显的抑菌圈。
我们组的分析是 ...

那我要怎样做才能把这内层的不透明圈给去掉?
8楼2012-05-15 11:59:54
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thiophene9859

金虫 (小有名气)

大肠杆菌抑菌试验?用活体大肠杆菌还是代谢产物?
如用活体,必然出现双圈现象。用活体的话,菌体不断的产生代谢产物,代谢产物通过琼脂不断扩散,具有抑菌活性,扩散的面积明显大于大肠杆菌菌体生长的范围,所以具有明显的透明外圈,内圈由于具有菌体,模糊不清。
仅供参考
9楼2012-05-15 13:32:42
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飞鱼1112

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by thiophene9859 at 2012-05-15 13:32:42:
大肠杆菌抑菌试验?用活体大肠杆菌还是代谢产物?
如用活体,必然出现双圈现象。用活体的话,菌体不断的产生代谢产物,代谢产物通过琼脂不断扩散,具有抑菌活性,扩散的面积明显大于大肠杆菌菌体生长的范围,所以 ...

是用活体大肠杆菌的,那这样的话,抑菌圈应该算是那部分?就只算透明的部分吗?
10楼2012-05-15 13:58:47
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