24小时热门版块排行榜    

查看: 3171  |  回复: 12

tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-12 22:34:50:
72℃估计还不够,这只是普通延伸的温度啊。我自己做的荧光定量,目的片段在熔解曲线上的峰对应的温度一般在80~85℃之间,我觉得这个温度可以在80度上下。我还是上一个回复那个意思:具体取几度,应该可以参照熔解 ...

斑竹您好,这是我用三步法扩增时得到的溶解曲线,设置在72度读数,不过后面有个小峰,我不知道会不会影响最后的读数,我总共做了几十个样本,只有这四个(平行样)后面有小峰。。。能否给点意见?是否需要重新做一下?


11楼2012-05-20 23:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

后面的峰肯定不是引物二聚体了,解链温度这么高。可能是非特异扩增,你可以跑个电泳看看有没有条带。个人意见,仅供参考哈
12楼2012-05-20 23:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学术问题

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-12 15:39:48
呵呵,不好意思,孤陋寡闻了,之前没听说过有这么做的
刚看了下天根的资料,有提到如果有引物二聚体怎么处理,其中一个方法是“在延伸反应结束之后加上一个温度(高于引物二聚体解链温度而低于目的片段解链 ...

可以具体发一个程序图吗?是在每一个循环后加一个79度 5s 吗?比如我用的这个程序怎么改?
定量PCR读取荧光值的步骤需要保持多长时间?
6.png

微生物小硕
13楼2013-10-09 10:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tingspdf 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 86/4300 2026-08-18 00:18 by longsantaizi
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见