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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 高手看看我提取的RNA可以进行RT-PCR吗
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adloves

新虫 (小有名气)

[求助] 高手看看我提取的RNA可以进行RT-PCR吗

最近提取的米曲霉RNA图，不知道可不可以做RT-PCR，求高人指教~~
我用的提取液是TaKaRa公司的RNAiso Plus，步骤按他们给的来做的， 稀释十倍点样。

米曲霉RNA提取图
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杜钰~
1楼 2012-05-05 21:25:36
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
引用回帖:
12楼: Originally posted by zcs12506009 at 2012-05-19 13:32:15
降解严重  建议：1.对所用的所有的试剂和器材进行去RNase 2. 提取的时候带干净手套和口罩 3.跑电泳之前，对电泳槽用酒精擦拭并晾干  4.电泳的时间不要太长，15min左右即可，避免rna降解

您好，我想请问电泳15min的具体条件是什么呢？比如恒压还是恒流

发自小木虫Android客户端
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14楼2017-03-11 10:19:34
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涌动的泉

铜虫 (知名作家)
降解了，建议重新提过
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我们的过去，成就了如今的我们，无需悔恨
2楼2012-05-06 09:12:49
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adloves

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 涌动的泉 at 2012-05-06 09:12:49:
降解了，建议重新提过

恩  好吧~ 谢谢！
回复此楼
杜钰~
3楼2012-05-06 10:08:45
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-06 19:12:24
降解十分严重，而且有很严重的蛋白质污染，这样逆转录的时候会有影响的。建议你把这次当做练手，就不要再往后做了，重新提取一次会比较好。下次操作吸取上清的时候一定要当心，不要吸到中间层，宁缺毋滥。降解比较严重的话建议你把使用的工具和耗材重新处理一下，避免RNase的污染。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2012-05-06 10:29:30
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