应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR体系放大后无目的片段
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
162/2返回列表上一页12
查看: 2581  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

冰岩8625

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以多做几个体系，试一下条件如，20、40微升，就可以知道什么原因了。一同一批次中，一般不会有某一管有问题吧~~~？？！！
赞一下 回复此楼
11楼2012-05-24 19:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰岩8625

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以多做几个体系，试一下条件如，20、40微升，就可以知道什么原因了。一同一批次中，一般不会有某一管有问题吧~~~？？！！
赞一下 回复此楼
12楼2012-05-24 19:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰岩8625

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以多做几个体系，试一下条件如，20、40微升，就可以知道什么原因了。一同一批次中，一般不会有某一管有问题吧~~~？？！！
赞一下 回复此楼
13楼2012-05-24 19:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q307078056

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by faile18 at 2012-05-05 01:13:13
多做几管不担心某一管出现错配吗？...

有很多办法确定你的技术性重复是否有误的呀..
譬如：PAGE电泳、荧光重复性..
赞一下 回复此楼
人生不是一种享受，而是一桩沉重异常的工作
14楼2013-04-21 08:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyuzhu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
15楼2013-04-21 10:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

还是PCR扩增的专一性问题
Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特 异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。一般Mg2+离子浓度可以从1mmmol/L逐渐上升，到10mmmol/L就不要再高了，每次上升Mg2+离子浓度的梯度为1mmmol/L。　　
PCR循环条件和反应体积的改变：PCR循环25次也就差不多了，再往后可能扩增的专一性就不一定能保证了，高手除外。通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul，应用多 大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul 后，再做大体积时，一定要模索条件，否则容易失败。
引物：既然你过去都能成功，估计引物序列问题不大，但是要调整引物浓度和其与模板的结合温度。
总体上，最先检查模板质量和酶质量，再调Mg2+浓度，接着调引物浓度和其与模板的结合温度，再控制循环次数和反应体积，这些都不行，那就要重新设计引物。另外，考虑热启和加入少量BSA也有利于专一性PCR扩增。
赞一下 回复此楼
16楼2013-04-21 12:11:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 faile18 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +18 111623 2026-04-04 20/1000 2026-04-06 00:35 by T可可西里T
[考研] 生物与医药求调剂 +5 heguanhua 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:58 by Hdyxbekcb
[考研] 求调剂 +4 chenxrlkx 2026-04-05 6/300 2026-04-05 18:38 by imissbao
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 385分 生物学（071000）求调剂 +11 qf626 2026-04-01 11/550 2026-04-05 17:35 by Ecowxq666！
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 4/200 2026-04-05 11:48 by arrow8852
[考研] 11408,335分，本科211，求调剂，可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 324求调剂 +14 想上学求调 2026-04-02 15/750 2026-04-04 20:31 by 无际的草原
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 400分求调剂 +3 尴尬且挠头 2026-04-04 3/150 2026-04-04 08:41 by jp9609
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 求调剂 +4 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:07 by zrongyan
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +20 Youth_ 2026-03-30 20/1000 2026-04-02 14:48 by 5896
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 【求调剂】新能源材料本科，一志愿211，初试321 +6 求调剂学校， 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135，现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭