24小时热门版块排行榜

返回列表

本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

落雪含香

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 965.5
散金: 135
红花: 1
帖子: 537
在线: 93.9小时
虫号: 829451
注册: 2009-08-17
专业: 药物分析

[求助] 共聚焦显微镜和荧光显微镜区别

我看文献中描述，在观察一种荧光染料进入细胞的情况时，先用DAPI染了细胞核，用荧光显微镜观察完还要用共聚焦显微镜观察，有区别吗？我怎么觉得用荧光显微镜就可以了啊，细胞核蓝色，荧光染料红色，在细胞质中，看的很明显啊，为啥还要用共聚焦显微镜啊？

回复此楼

1楼 2012-04-28 21:24:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

专家经验: +426
BioEPI: 7
应助: 1217 (讲师)
金币: 9097.3
散金: 16445
红花: 226
帖子: 4669
在线: 2320.2小时
虫号: 1136974
注册: 2010-11-02
性别: GG
专业: 植物生理与生化
管辖: 动植物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+3, BioEPI+1, 欢迎专业的虫友经常来交流哈` 2012-04-29 09:45:05
落雪含香: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 太棒了，我觉得您解决我一大难题，谢谢您！ 2012-05-01 12:52:28

两者的区别有点象医院照X光和做CT。
事实上激光共聚焦是荧光显微镜的升级版。传统荧光显微镜是用汞灯或氘灯照射整个样品平面，再进行观察或用CCD设备拍得图像。由于聚焦平面上下的平面上也有荧光被激发，因此结果图像会被干扰，同时目标样品区域同一平面上其他部分的荧光也可能干扰观察结果。激光共聚焦显微镜用激光光源在样品上逐点成像解决这个问题，因此其成像更加清晰。此外，激光共聚焦显微镜分辨率有提高（使用特殊光源如紫外光），还可以逐层扫描三维成像，利用多通道采集图像的功能同时获取不同光谱段的荧光信号获得叠层图像。
对于DAPI染色，用荧光显微镜就可以获得结果，有文章同时用两种方法，我估计是由于激光共聚焦设备配备成本较高，没有荧光显微镜普遍，因此在使用荧光显微镜获得结果的情况下再用共聚焦获得高质量图片。