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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

还有一点,你的胶图这么好看,可见跑了很久,片段小的话很有可能已经跑出去了...
11楼2012-04-28 15:54:44
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glcmu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也经常遇到此种情况,这图看着像切开,很可能跑过了,小的条带跑出去了
12楼2012-04-28 16:15:08
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

你的目的片段多大?看你这个图双酶切比但酶切的载体片段要小,那么目的片段应该是切下来了,看不到没关系,可能和你目的片段过小,EB染色不完全有关系。
13楼2012-04-28 20:20:31
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刘雨999

新虫 (初入文坛)

我认为是酶切质粒量少,条带暗,看不清
14楼2012-05-07 19:27:43
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friya0910

新虫 (正式写手)

楼主的目的片段是多大的呢?我之前也是用这两个酶进行双酶切,目的片段300bp,目的条带非常淡,基本看不清。后来我重提质粒,最后溶解的时候少加点溶解液,提高质粒浓度再切,会稍微好点,但是如果你的目的片段很小的话,想看到非常亮的带基本是不太可能的。
15楼2012-05-18 09:07:58
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动力泉

金虫 (正式写手)

建议楼主做一下菌液PCR
好好学习
16楼2012-05-18 18:51:40
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aiweiyiren

新虫 (初入文坛)

哥们,你胶跑这么开干嘛啊,当然看不到的了,看你切的量大约也就1.5ug,一般来说你切2ug去跑胶,差不多刚把胶跑出孔1cm左右你就可以把300bp以下的条带收回来了。再跑就看不见了。
17楼2012-06-02 23:13:28
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hgh2012

金虫 (著名写手)

应该是真正双酶切的量太低,实验可以继续做,不用管
工作是为了生存
18楼2012-06-03 09:33:11
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荡羁狂客

新虫 (初入文坛)

学习一下
19楼2013-03-10 14:30:43
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安琪儿水晶

金虫 (正式写手)

那个如果做PCR批出来的时候是不是就是连上了啊?各位请教一下啊!
相信自己,总会好的!
20楼2013-07-11 16:45:58
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