24小时热门版块排行榜    

查看: 3388  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 本来带有质粒的大肠杆菌再对它进行一次质粒转化能达到增加质粒拷贝数的目的吗?

本来带有质粒的大肠杆菌再对它进行一次质粒转化能达到增加质粒拷贝数的目的吗?我的大肠杆菌是带有目的蛋白表达质粒的,但是我导师说再对这个菌株进行一次质粒转化来强化一下,我就纠结了,能达到强化的目的吗?有做过类似实验的虫子吗?求赐教,金币不是问题啦^_^
回复此楼
好孩子!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

喷了。 有用就有鬼了。   你怎么操作?   同样质粒肯定长满板都是菌,如果用不同抗性你要保证origin相容,而且意思也完全变了。
你如果菌株觉得有问题,就重新转一次到没有质粒的感受态细胞里。
11楼2013-05-11 13:13:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-26 15:55:20
zhang8826857: 金币+4, 有帮助 2012-06-11 10:56:53
这个应该不可以吧,质粒的拷贝数是由质粒的复制子类型决定的,每次转化的时候只有一个质粒进入细胞,然后质粒再复制,你这个本身都有一样的质粒,这还涉及到一个质粒不相容的问题,反正归根结底还是一个质粒在里面,个人感觉用基础知识来回答的话,没有可能增加吧。
2楼2012-04-26 09:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-26 15:55:39
zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-06-11 10:57:00
你两次转化的质粒都是同一个质粒吗?
任何两种含有相似复制子结构的不同质粒,不能同时存在于一个细胞中,这是质粒的不相容性。
未来不是梦
3楼2012-04-26 10:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-26 15:56:05
zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-06-11 10:57:11
你老板的意思应该是怕质粒丢失吧,因为一个菌多次转接,有可能造成菌体的抗性,那样质粒上的抗性基因就不起作用了,质粒就丢了。。。特别是Amp的时候

再转一次会好点
小木虫之有关部门负责人
4楼2012-04-26 11:43:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见