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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)

[交流] 定量PCR96孔板加样问题 已有9人参与

最近做定量要用到96孔板,加样时有气泡又没法离心,不知大家有什么高招可以避免这个问题呢?
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chlorella409

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-24 18:38:28
加样的时候可以用倒加法,枪按到第二档吸液,排液时按到第一档。相同的成分还可以配好mixture,再分装。还有就是可以买个板式离心机,国产的就行。四楼说的也对,预变性那步,那么高的温度气泡就破了。
7楼2012-04-24 17:10:19
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西瓜: 金币+2, Good! 2012-04-24 18:38:09
加完样后小心的用手甩一下,不过这个需要技术,可以先拿跑废的板子找一下感觉。其实即使有点气泡也问题不大,在预变性和变性那一步,气泡一受热就没了
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2012-04-24 15:53:59
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加样时先加量大的成分,你可以混好体系再分装,加样时尽量打到枪的第一档。不知道还有没有其他高照没?
hehe
2楼2012-04-24 14:21:35
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-04-24 14:21:35:
加样时先加量大的成分,你可以混好体系再分装,加样时尽量打到枪的第一档。不知道还有没有其他高照没?

那还是加样的时候小心点喽。枪只打到第一档会不会存在加样量不准确的问题呢?
3楼2012-04-24 15:05:09
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xudabin98

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么不能够离心呢?你们实验室没有板式离心机吗?如果没有的话,盖上膜使劲甩上几圈也没多大问题。
6楼2012-04-24 16:38:54
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土星人79

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-04-24 17:10:19:
加样的时候可以用倒加法,枪按到第二档吸液,排液时按到第一档。相同的成分还可以配好mixture,再分装。还有就是可以买个板式离心机,国产的就行。四楼说的也对,预变性那步,那么高的温度气泡就破了。

国产有这种专用离心机,甩一下就好
9楼2012-04-24 23:00:29
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 欢迎新虫 2012-04-25 13:52:56
我一般先配好mix,分装时贴壁加,最后一下吹枪的时候要快;
最后再加入5ul模板,由于体积大,液体会自动贴壁滑下去的,因此不会有气泡。
最后,在超净台面顿两下,让少量挂壁液体也全沉到管底。
不离心,不振荡,结果也挺好的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

偶时晴天偶时雨
11楼2012-04-25 08:55:58
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vinner

木虫 (正式写手)

小抽一下真空
5楼2012-04-24 15:54:44
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2012-04-24 15:53:59:
加完样后小心的用手甩一下,不过这个需要技术,可以先拿跑废的板子找一下感觉。其实即使有点气泡也问题不大,在预变性和变性那一步,气泡一受热就没了

有道理,谢谢!
8楼2012-04-24 19:51:49
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swimmingcrab

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 土星人79 at 2012-04-24 23:00:29:
国产有这种专用离心机,甩一下就好

这个。。。估计老板不会给买
10楼2012-04-25 08:34:20
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