24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1615  |  回复: 15
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

janedcm

银虫 (小有名气)

[交流] 今天第一次做蛋白质电泳,出现的怪事!

今天是我第一次做蛋白质电泳, 出现了一些不该有的现象:
1.样品没有在浓缩胶中压缩成一条线,而是较宽的带,
2.当样品走到分离胶中下部时,中部的溴酚蓝消失了,而出现了黄色的物质,
3.当样品继续向下走时,几乎全部的蓝色都消失了,都变成了黄色,
4.当要把胶从玻璃板了取下时,浓缩胶部分几乎都粘到了玻璃板上, 无法整块的取下, 而分离胶部分则易碎,也不能整块取下,
我发现在我把样品煮沸后,体积增大了,可能是进水了, 电泳槽是新买的,电泳仪是旧的,听说配电泳缓冲液要用无菌水,而我开始没有用无菌水,所以后来我就把电泳缓冲液灭菌了,但是后来发现pH变了,所以我也认为缓冲液可以也是不合适的,但是黄色物质的出现,我就不知是为何了, 还有其他几个现象我也不知如何解释,请各位高手帮忙,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ntu-knight


asr(金币+1):Thanks!
其实我也遇到过这种情况,可能是Tris缓冲液配的不对,PH值是很重要的,你最好重新配一下,用考马斯亮蓝考染一下,看看蛋白的条带.总之,PH值在蛋白质电泳中是很重要的.
4楼2007-04-07 18:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

liyxok

银虫 (小有名气)

★ ★
asr(金币+2):Thanks!
1 没被压缩成线的问题,可能是开始时电流过大,一般浓缩胶小电流,分离胶大电流,此外还要保持胶的温度不要过高,开冷却水。
2 胶去不下来,原因可能是玻璃板没洗干净。一般先用洗衣粉泡,清水冲洗,再用酒精擦洗,用蒸馏水冲洗,晾干。一定要洗干净才行。
3 缓冲液pH一定要准确测定,是电泳成功的关键因素,浓度不易过高。
4 上样前离心
5 胶浓度大了易脆
欢迎交流
Blog:http://liyxkkk.blog.163.com/ 主页:http://n.99081.com/liyxok/
2楼2007-04-06 23:49:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mapleleaf7410

木虫 (正式写手)


asr(金币+1):Thanks!
没必要用无菌水配缓冲液。你的样品要离心去沉淀。
5楼2007-04-08 16:04:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

TAMAHOME

金虫 (小有名气)

还有在制胶的时候让其凝固时间长一些,凝的过程中不要晃动胶板,保正胶凝的均匀,胶凝的不均匀的话跑的时候也会出问题。
样品可能也没处理好,上样前要离下心。
还有分离胶的浓度是不是大了一些,可适当降低一些
让死者有那不朽的名,但让生者有那不朽的爱──
6楼2007-04-08 22:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 6/300 2026-04-04 10:08 by 一切OK
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-30 8/400 2026-04-04 08:33 by leqianduo
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[考研] 275求调剂 +14 waltzh 2026-04-01 14/700 2026-04-03 11:24 by qqq850810
[考研] 生物学求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 3/150 2026-04-03 10:28 by macy2011
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +20 Youth_ 2026-03-30 20/1000 2026-04-02 14:48 by 5896
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 291求调剂 +20 Y-cap 2026-03-29 25/1250 2026-04-01 23:49 by 欣喜777
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 5/250 2026-04-01 15:32 by 图鉴212
[考研] 085410人工智能 初试316分 求调剂 +3 残星拂曙 2026-03-31 3/150 2026-04-01 11:09 by 小熊raider
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:07 by Wang200018
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
信息提示
请填处理意见