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whitney1989银虫 (小有名气)
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For electrophysiological analysis,MCF-7 cells were cultured in 35 mm petri dishes.Electrophysiological signals were recorded,amplified, digitized,and analyzed with the use of an Axopatch 200B patch-clamp (Axon Instruments,Burlingame,CA)in conjunction with Labmaster hardware(Digidata 1200,Axon Instruments)and Pclamp software(ver 6.03,Axon Instruments).The whole-cell mode of the patch-clamp technique was used with 4–7 MV resistance borosilicate fire-polished pipettes(Hirschmann 1 ,Laborgerate,Eberstadt,Germany).Seal resistance was typically in the 10–20 GV range.After formation of a seal,the amplifier was switched to voltage-clamp mode and currents attained stable values within 3–5 min.All recordings were made without leak subtraction.Results were expressed using current- densities(pA/pF)instead of current amplitude.The cell surface of the MCF-7 cells was thus estimated by measuring their membrane capacitance(20.8 4.7 pF,n?63).Whole-cell current was elicited by voltage ramp or by voltage step from 80 tot80 mV delivered at 30 sec intervals for 250 msec,applied from a holding potential of 40 mV.The cell under investigation was continuously superfused with control or test solutions. |
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【答案】应助回帖
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sltmac: 金币+4 2012-05-11 08:06:18
| 为了电生理分析，将MCF - 7细胞培养在35毫米培养皿。将电生理信号的记录，放大，数字化，并分析了使用一个Axopatch 200B膜片钳（轴突仪器，蒲安臣，加利福尼亚州）结合实验室主硬件（digidata 1200，轴突仪器）和膜片箝软件（ver6.03，轴突文书）。膜片钳技术全细胞模式是用4–7压阻硅火抛光管（赫思曼，laborgerate，艾伯斯塔德，德国）。密封电阻通常是在10–20GV范围内。形成密封后，放大器切换到电压钳模式且电流在3–5分钟之内达到稳定值。所有的记录都在无衰减时做得。结果表示使用电流密度（pA/pF）代替电流幅值。MCF - 7细胞的表面因此可估计得到通过测量膜电容（20.8 4.7 pF,n?63)。全细胞电流引起被探测出通过斜坡电压或电压在30秒内从80 到80mv维持250毫秒，适用于恒压40毫伏。考察的细胞是不断被可控冷却或测试解决方案。 |
2楼2012-04-23 00:02:37
whitney1989
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4楼2012-04-23 10:40:36
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