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cctt0661

木虫 (小有名气)

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专业: 无机材料化学

[求助] EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道出现亮条带

EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道内只加入了溴酚蓝、水和甘油。但在凝胶成像仪中发现该孔道有亮条带，这是怎么回事啊？
重复两次，现象相同。
有做过的吗？也是这样现象吗？

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1楼 2012-04-19 11:38:39

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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

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专业: 生物化工与食品化工

【答案】应助回帖

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第一，你用的是不是10X的loading buffer？如果是的话，可能的原因是：10X的buffer是有停止酶的反应的功能的，也就是让酶变性。由于pcr中有taq酶，所以会产生额外的条带。当这个条带和你的目的片段大小相似的时候。可能他们就重叠在一起了，就会变得更亮。所以我建议你在跑的时间长一点，说不定两条带就分开了，或者你可以做些大片段（如片段产物1kb）的pcr，来验证我说的
第二，如果是6X的loading buffer的话，那就是你的buffer污染了，你可以再换一管用。