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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道出现亮条带
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cctt0661

木虫 (小有名气)

[求助] EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道出现亮条带

EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道内只加入了溴酚蓝、水和甘油。但在凝胶成像仪中发现该孔道有亮条带，这是怎么回事啊？
重复两次，现象相同。
有做过的吗？也是这样现象吗？
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1楼 2012-04-19 11:38:39
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一，你用的是不是10X的loading buffer？如果是的话，可能的原因是：10X的buffer是有停止酶的反应的功能的，也就是让酶变性。由于pcr中有taq酶，所以会产生额外的条带。当这个条带和你的目的片段大小相似的时候。可能他们就重叠在一起了，就会变得更亮。所以我建议你在跑的时间长一点，说不定两条带就分开了，或者你可以做些大片段（如片段产物1kb）的pcr，来验证我说的
第二，如果是6X的loading buffer的话，那就是你的buffer污染了，你可以再换一管用。
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13楼2012-04-21 15:40:43
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320080920001

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 可以详细分析一下的啊 2012-04-19 15:52:38
应该是你的loading buffer DNA污染吧
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2楼2012-04-19 14:57:40
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cctt0661

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 320080920001 at 2012-04-19 14:57:40:
应该是你的loading buffer DNA污染吧

也就是说EB和溴酚蓝是不会显色的？
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3楼2012-04-19 16:42:29
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YZQ_XM

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不会啊，没有东西显什么色，应该是污染了。
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4楼2012-04-19 16:55:20
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