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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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terry130

木虫 (正式写手)

[交流] 求助关于EB电泳的问题

琼脂糖浓度1.4%,北京六一的水平电泳槽(20cm)和电泳仪。凝胶中EB含量万分之零点五,电泳电压70-100V,缓冲液是1×TAE。

以上是我电泳的条件,结果跑完后胶板的上半部分发红色,严重影响照片质量。感觉好像是EB在胶中反向迁移造成的,不知道是不是我的条件设得不对(我是按分子克隆上得说明做得啊),请问高手如何解决这样的问题。
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摒气动方息,宁神心自明。
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lys6827

木虫 (著名写手)

我们实验室是这样配制检测胶的:称琼脂糖1g,加TAE100ml,溶胶后稍微冷却加EB 2微升。还有胶最好先配先用
7楼2007-04-03 23:31:49
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lsyiming2008

铁虫 (初入文坛)

你跑的是多大的片段?
条带清楚吗?
2楼2007-04-03 13:02:56
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lsyiming2008

铁虫 (初入文坛)

怀疑你的质粒被DNase污染了
3楼2007-04-03 13:14:26
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breath2006

银虫 (初入文坛)


whxhxq(金币+1):thanks!
感觉好像是EB在胶中反向迁移造成的 这个是不可能的 EB没有结合东西怎么可能显示出颜色来,你的EB都万分之0.5了 不可能是浓度过高的原因,(浓度过高也可能是胶体是红色,但决不是半块胶红色 ,而是整块的,)所以,我给你几个可能原因:
1。 你的胶是不是被污染了。
2。电泳buffer是不是也有问题,如果不是新的换。
3。再有就是你的梳子是不是有问题,是不是有以前跑的DNA之类的污染。
总之我认为你的是污染问题 决不是什么Eb跑到负级了
4楼2007-04-03 21:46:25
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