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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by diy患者 at 2012-04-15 21:34:39:
不同意这个观点。amp没有这么脆弱。我估计正常阴性对照37度放上三四天是不会长大肠的。

当然，我一般用的浓度是上限100的浓度。

我们用的是终浓度是100ug/mL的Amp，抗性确实不能持续多久呢。
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11楼2012-04-16 00:55:30
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by diy患者 at 2012-04-15 21:34:39:
不同意这个观点。amp没有这么脆弱。我估计正常阴性对照37度放上三四天是不会长大肠的。

当然，我一般用的浓度是上限100的浓度。

可能跟菌的耐受性也有关，我们做转化时，平板在37℃放上一天就会有卫星菌落长起来，你们的怎么样？
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12楼2012-04-16 01:00:15
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by diy患者 at 2012-04-15 21:35:53:
1.先确定是不是大肠，如果是，那说明可能你的amp浓度太低了。
2.不是大肠，说明污染了，有些杂菌天生抗amp

转化平板（amp培养基上接转了质粒的大肠）二十多个小时后长得菌不确定是不是大肠，但是因为阴性对照（在amp培养基上接没转质粒的大肠）上没长，是不是可以基本上认为是杂菌，另外，我加的amp的量是100的。
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O(∩_∩)O哈哈~
13楼2012-04-16 16:35:42
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-16 00:53:59:
不好意思，之前不知怎么没看到……可能是阴性对照放久了，抗生素失效，没转化的菌也能长起来了。

没关系……阴性对照上没长菌的
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O(∩_∩)O哈哈~
14楼2012-04-16 16:37:13
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diy患者

铁虫 (正式写手)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-04-16 21:25:10
引用回帖:
12楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-16 01:00:15:
可能跟菌的耐受性也有关，我们做转化时，平板在37℃放上一天就会有卫星菌落长起来，你们的怎么样？

在上个回复中我就想谈卫星菌落来着。

卫星菌落有点奇怪，有时候长的很多，有时候却没有，一般20个小时以后，比转后菌落小的多，而且分布很有规律，越远越少，容易鉴别。
为了防止卫星菌落，我才用100的浓度，但是依然阻止不了。
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15楼2012-04-16 18:58:11
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diy患者

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+4, 说的很详细啊~欢迎您常来！ 2012-04-16 21:26:33
引用回帖:
13楼: Originally posted by chenxueqiao at 2012-04-16 16:35:42:
转化平板（amp培养基上接转了质粒的大肠）二十多个小时后长得菌不确定是不是大肠，但是因为阴性对照（在amp培养基上接没转质粒的大肠）上没长，是不是可以基本上认为是杂菌，另外，我加的amp的量是100的。

转化有时候结果很奇怪，我自己做，都很完美，现在让学生做，没有做完美的。关键有时候，我也很难解释结果。

我认为是杂菌，除开卫星菌落，没有质粒的大肠应该不会长出来，除非抗生素失效。

另外，从菌的形态可以判断污染情况，污染的来源有涂布的时候污染，这种情况一般是真菌，最容易污染的是把试管种倒加进锥形瓶里的时候，这种菌一般也是细菌，分布均匀。如果是培养的时候污染的，一般是真菌，且分布不均匀，边缘比较多。
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16楼2012-04-16 19:02:21
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XOooZzz

银虫 (小有名气)
平常大肠在氨苄上超过16小时容易长卫星菌落，估计是因为amp被抗性菌分泌的β—内酰胺酶分解了，所以使得非转化菌生长。
lz的情况大约不是抗生素失效，但我也不清楚是什么情况。lz说的更长时间是多长？可以做个菌落pcr看看
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17楼2012-04-17 01:03:57
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)
amp浓度太高了吧
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18楼2012-05-31 19:01:22
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