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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请帮我看看提取质粒的图是出了什么问题
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可帅儿

银虫 (正式写手)
请问LZ用的什么方法提取DNA的？
电泳时间可以稍微缩短些呢
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
11楼2012-04-13 18:22:14
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-04-13 18:22:14:
请问LZ用的什么方法提取DNA的？
电泳时间可以稍微缩短些呢

稍微改了的碱裂解法提的质粒，我们实验室都是80v跑50分钟
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12楼2012-04-13 23:04:29
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sl35537417 at 2012-04-12 21:56:14:
可以用RNase处理一下

我们实验室都不处理RNA的，一般认为跑在最前面的就是RNA
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13楼2012-04-13 23:06:21
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by yijunliu at 2012-04-13 17:20:22:
补充：还有就是看图片的话好像电泳时间有点长，可以缩短点时间。此外，加完P2后要让菌体充分裂解，但时间不要超过5min。

嗯，谢谢啊！我们加溶液2和溶液3都是轻轻的加，没有混匀，溶液3加完有絮状沉淀，没有进行混匀的操作。。。
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14楼2012-04-13 23:09:38
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王雨云 at 2012-04-13 17:14:25:
这个情况不知道是不是用washing buffer 洗完之后没烘干,有酒精残留的原因

哦，下次我注意一下，谢谢！
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15楼2012-04-13 23:10:00
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sl35537417

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by applexixixi at 2012-04-13 23:06:21:
我们实验室都不处理RNA的，一般认为跑在最前面的就是RNA

我只是建议    当然一般情况下RNA是跑在最前面的  这个谁都知道
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16楼2012-04-13 23:14:03
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sl35537417

木虫 (正式写手)
另外 为什么不用control ？还有你用的试剂是你自己现配的 还是 实验室公用的，我们之前提质粒用的123全是自己配的  很正常
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17楼2012-04-13 23:17:21
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yijunliu

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by applexixixi at 2012-04-13 23:06:21:
我们实验室都不处理RNA的，一般认为跑在最前面的就是RNA

加完P3是要充分混匀的，这样蛋白质才会除的比较干净~
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18楼2012-04-14 13:26:52
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by sl35537417 at 2012-04-13 23:17:21:
另外 为什么不用control ？还有你用的试剂是你自己现配的 还是 实验室公用的，我们之前提质粒用的123全是自己配的  很正常

嗯，确实是要对照的，这两天在做。试剂是公用的，只有溶液2是现用现配，我刚刚开始实验，正在学习阶段，谢谢前辈指点啊~
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19楼2012-04-14 16:30:39
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applexixixi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by yijunliu at 2012-04-14 13:26:52:
加完P3是要充分混匀的，这样蛋白质才会除的比较干净~

嗯，好像我每次都有蛋白，下次注意，谢谢~~~
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20楼2012-04-14 16:31:16
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