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可帅儿

银虫 (正式写手)

请问LZ用的什么方法提取DNA的?
电泳时间可以稍微缩短些呢
追随自己的心!不要做让自己后悔的事!
11楼2012-04-13 18:22:14
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-04-13 18:22:14:
请问LZ用的什么方法提取DNA的?
电泳时间可以稍微缩短些呢

稍微改了的碱裂解法提的质粒,我们实验室都是80v跑50分钟
12楼2012-04-13 23:04:29
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by sl35537417 at 2012-04-12 21:56:14:
可以用RNase处理一下

我们实验室都不处理RNA的,一般认为跑在最前面的就是RNA
13楼2012-04-13 23:06:21
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yijunliu at 2012-04-13 17:20:22:
补充:还有就是看图片的话好像电泳时间有点长,可以缩短点时间。此外,加完P2后要让菌体充分裂解,但时间不要超过5min。

嗯,谢谢啊!我们加溶液2和溶液3都是轻轻的加,没有混匀,溶液3加完有絮状沉淀,没有进行混匀的操作。。。
14楼2012-04-13 23:09:38
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 王雨云 at 2012-04-13 17:14:25:
这个情况不知道是不是用washing buffer 洗完之后没烘干,有酒精残留的原因

哦,下次我注意一下,谢谢!
15楼2012-04-13 23:10:00
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sl35537417

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by applexixixi at 2012-04-13 23:06:21:
我们实验室都不处理RNA的,一般认为跑在最前面的就是RNA

我只是建议    当然一般情况下RNA是跑在最前面的  这个谁都知道
16楼2012-04-13 23:14:03
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sl35537417

木虫 (正式写手)

另外 为什么不用control ?还有你用的试剂是你自己现配的 还是 实验室公用的,我们之前提质粒用的123全是自己配的  很正常
17楼2012-04-13 23:17:21
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yijunliu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by applexixixi at 2012-04-13 23:06:21:
我们实验室都不处理RNA的,一般认为跑在最前面的就是RNA

加完P3是要充分混匀的,这样蛋白质才会除的比较干净~
18楼2012-04-14 13:26:52
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by sl35537417 at 2012-04-13 23:17:21:
另外 为什么不用control ?还有你用的试剂是你自己现配的 还是 实验室公用的,我们之前提质粒用的123全是自己配的  很正常

嗯,确实是要对照的,这两天在做。试剂是公用的,只有溶液2是现用现配,我刚刚开始实验,正在学习阶段,谢谢前辈指点啊~
19楼2012-04-14 16:30:39
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by yijunliu at 2012-04-14 13:26:52:
加完P3是要充分混匀的,这样蛋白质才会除的比较干净~

嗯,好像我每次都有蛋白,下次注意,谢谢~~~
20楼2012-04-14 16:31:16
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