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麻花13

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[求助] 密码子插入的引物设计问题

改造pET22b载体，现在信号肽中加入一个K，请问如何设计插入突变引物？
如果是单纯的氨基酸置换突变的引物设计，比较容易设计，用overlap
但是插入突变呢？如果在引物中添加了3个额外的碱基，额外加入的碱基下游的其他原本基因上的碱基，在退火过程中还能与模板结合吗？

请指教

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1楼 2012-04-11 09:28:57

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