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熊猫高高

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时定量标准曲线扩增效率偏高怎么办

最近在做实时定量PCR,做了6个引物,其他的都是90%多,有两个感觉偏高,一个是106%,一个是113%,正常的是不是在90-105%之间呢?出现这种情况是什么原因呢,引物感觉没什么问题,是试剂公司帮忙设计的,降低了引物额浓度好像效果不好,请各位大咖帮忙指点,多谢
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核, 辛苦 2012-04-11 13:46:09
90%到120%都可以接受,楼主的扩增效率已经很好了,系统的稍微误差都可能导致你的扩增效率发生点变化。如果担心太高,可以提高下退火温度
2楼2012-04-11 09:31:28
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熊猫高高

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-11 09:31:28:
90%到120%都可以接受,楼主的扩增效率已经很好了,系统的稍微误差都可能导致你的扩增效率发生点变化。如果担心太高,可以提高下退火温度

谢谢您的回复,那我就放心了,我再提高一下试试
3楼2012-04-11 10:05:39
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