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新虫 (初入文坛)

[求助] 实时定量标准曲线扩增效率偏高怎么办

最近在做实时定量PCR，做了6个引物，其他的都是90%多，有两个感觉偏高，一个是106%，一个是113%，正常的是不是在90-105%之间呢？出现这种情况是什么原因呢，引物感觉没什么问题，是试剂公司帮忙设计的，降低了引物额浓度好像效果不好，请各位大咖帮忙指点，多谢

1楼 2012-04-11 08:46:59

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金虫 (著名写手)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 专家考核, 辛苦 2012-04-11 13:46:09

90%到120%都可以接受，楼主的扩增效率已经很好了，系统的稍微误差都可能导致你的扩增效率发生点变化。如果担心太高，可以提高下退火温度

2楼2012-04-11 09:31:28

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新虫 (初入文坛)

引用回帖:

2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-11 09:31:28:
90%到120%都可以接受，楼主的扩增效率已经很好了，系统的稍微误差都可能导致你的扩增效率发生点变化。如果担心太高，可以提高下退火温度

谢谢您的回复，那我就放心了，我再提高一下试试

3楼2012-04-11 10:05:39

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