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mas1208ter铁杆木虫 (正式写手)
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关于胆碱与乙酰胆碱！ 已有2人参与
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最近需要做胆碱与乙酰胆碱的传感器，但是不了解这两种物质的催化酶也就是胆碱氧化酶与乙酰胆碱酯酶的结构与信息，急切想知道这两种酶的圆二色谱信息，其中α螺旋与β折叠的比例问题，酶的尺寸大小，形状‘，活性区域等，希望好心人给予帮助！ 感谢帮忙！ |
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AChE 晶体结构： 1991 年, Sussman 等首次报道了电鳐(Torpedocalifornica, Tc) 的AChE 催化亚基晶体X射线衍射图谱。该催化亚基是由14 个A螺旋与12 个B折叠组成的大小为415 nm ×610 nm×615 nm 的椭球形分子, A螺旋、B折叠在晶体中的含量分别为15%、30% , B折叠位于椭球形分子的中央, A螺旋将其包围。AChE 的晶体形式是有糖酯锚的同源二聚体, 同源二聚体被42螺旋束抱紧, 42螺旋束由来自每个亚单位的螺旋AF’3 和AH 组成。唯一的链间二硫键与羧基端的Cys537 有关。氨基端和羧基端的1～ 3 氨基酸残基和暴露的噜噗(loop ) (485～ 489) 在电子密度图中看不到, 可能是因为末端的3 个氨基酸残基和膜锚定结构域的寡聚糖延伸是无序的。4 个糖基化位点之一A sn416 附近的电子密度与糖成分相对应。 乙酰胆碱酯酶的三维结构： 应用原子力显微技术对AChE 进行成像,发现AChE呈均匀的椭圆形颗粒,与X-衍射的形态相似,大小为98 ×79 ×3nm。AChE 活性中心由三个主要区域组成: ①酯解部位:含丝氨酸、组氨酸,能与ACh 的羰基碳原子结合; ②阴离子部位:至少含一个羰基,可能来自谷氨酸,能以静电吸引ACh 的季铵阳离子基团; ③疏水性区域:与酯解或季铵基团结合部位连结或在其附近,由色氨酸或酪氨酸等芳香族氨基酸组成,在与芳香基底物结合中起重要作用。 立体结构分析显示,其最突出的特征是有一深而窄的峡谷,AChE 的催化活性集团即位于此峡谷中。而在酶活性中心部位,过去认为静电吸收底物中带正电荷(氮) 部分的带6～9 个负电荷的阴离子部位可能并不存在,因其仅有一个带负电荷的Glu1299 氨基酸残基。ACh 的季铵阳离子基团可能通过与AChE 峡谷四周镶嵌着的芳香氨基酸残基的结合而发生相互作用。通过定点突变技术,显示酶的活性中心催化三联体单元为丝氨酸、组氨酸和谷氨酸,而通过计算机模拟研究TcAChE 与ACh 相互作用,认为催化三联体可能由丝氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸组成,谷氨酸则在促进质子转移过程中起重要作用。生理条件下,定位于突触后膜上的AChE 的生理功能主要是催化水解ACh ,这是通过AChE 活性中心酯解部位的催化作用实现的。人脑AChE 活性中心由丝氨酸、组氨酸、谷氨酸、丙氨酸、色氨酸和两个甘氨酸共7 个残基组成,直接作用于ACh 的催化三元体可能是丝氨酸、组氨酸和色氨酸3 个残基组成的。 |
2楼2007-03-31 10:05:57
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