24小时热门版块排行榜    

查看: 1971  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小彩84

新虫 (初入文坛)

[求助] 氨基酸在线衍生测定过程中遇到的一些问题

用的是Agilent 1100在线衍生测定氨基酸。对于液相的使用还不是很熟,希望虫友们给我些解决办法。
1 测定过程中压力变化大,基线漂移严重。用的是梯度洗脱。流动相为A: 40mM磷酸盐缓冲溶液;B: 乙腈:甲醇:水(45:45:10,V/V/V)。咨询安捷伦,说可能是磷酸盐缓冲液引起的,如果是的话,我该如何改色谱条件?
2 重现性不好,同一标样,相同条件下测出两种谱图。如何解决这个问题?

洗脱梯度



压力变化



基线变化



标样谱图
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小彩84 at 2012-04-10 23:27:56:
我用的是安捷伦测氨基酸专用的色谱柱- Zorbax Elipse AAA柱(4.6×150mm,5μm),说明书上梯度就那样要求的。
梯度上的柱后平衡时间延长,和跑完样后用磷酸盐冲长些时间效果应该是一样的吧?

效果应该是一样的
梦想、激情、灵感、体验--che
5楼2012-04-11 10:41:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小彩84: 金币+3, ★★★很有帮助, O(∩_∩)O谢谢 2012-04-10 23:28:24
lihongyan424: 金币+2, 谢专家,辛苦了。 2012-04-11 08:14:09
关于压力:
    我觉得压力变化没有问题,你是梯度洗脱,压力变动属于正常范围,压力只是随着梯度在变化,本身压力幅度并不大
关于基线:
    因为你的梯度是从100%磷酸盐缓冲液相到90%有机相,基线变动是略大些,我以为也可以接受,毕竟梯度在这摆着呢
关于梯度:
    你用的什么柱子,梯度一定要从100%磷酸盐缓冲液开始吗,能不能含有1-3%的有机相,这样对柱子和液相系统来说都好些,另外柱后平衡,从23.2到26min,似乎时间短了些,建议延长时间,以获得好的重现性
梦想、激情、灵感、体验--che
2楼2012-04-10 22:46:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小彩84

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-04-10 22:46:50:
关于压力:
    我觉得压力变化没有问题,你是梯度洗脱,压力变动属于正常范围,压力只是随着梯度在变化,本身压力幅度并不大
关于基线:
    因为你的梯度是从100%磷酸盐缓冲液相到90%有机相,基线变动是略大 ...

我用的是安捷伦测氨基酸专用的色谱柱- Zorbax Elipse AAA柱(4.6×150mm,5μm),说明书上梯度就那样要求的。
梯度上的柱后平衡时间延长,和跑完样后用磷酸盐冲长些时间效果应该是一样的吧?
3楼2012-04-10 23:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小彩84

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-04-10 22:46:50:
关于压力:
    我觉得压力变化没有问题,你是梯度洗脱,压力变动属于正常范围,压力只是随着梯度在变化,本身压力幅度并不大
关于基线:
    因为你的梯度是从100%磷酸盐缓冲液相到90%有机相,基线变动是略大 ...

最大压力时190bar,最小时90bar,变化是不是有点大?
4楼2012-04-11 10:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见