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氨基酸在线衍生测定过程中遇到的一些问题
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用的是Agilent 1100在线衍生测定氨基酸。对于液相的使用还不是很熟，希望虫友们给我些解决办法。 1 测定过程中压力变化大，基线漂移严重。用的是梯度洗脱。流动相为A： 40mM磷酸盐缓冲溶液；B： 乙腈:甲醇:水(45:45:10，V/V/V)。咨询安捷伦，说可能是磷酸盐缓冲液引起的，如果是的话，我该如何改色谱条件？ 2 重现性不好，同一标样，相同条件下测出两种谱图。如何解决这个问题？  洗脱梯度  压力变化  基线变化  标样谱图 |
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关于压力： 我觉得压力变化没有问题，你是梯度洗脱，压力变动属于正常范围，压力只是随着梯度在变化，本身压力幅度并不大 关于基线： 因为你的梯度是从100%磷酸盐缓冲液相到90%有机相，基线变动是略大些，我以为也可以接受，毕竟梯度在这摆着呢 关于梯度： 你用的什么柱子，梯度一定要从100%磷酸盐缓冲液开始吗，能不能含有1-3%的有机相，这样对柱子和液相系统来说都好些，另外柱后平衡，从23.2到26min，似乎时间短了些，建议延长时间，以获得好的重现性 |
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