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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 通过RT-PCR 获得了一段保守序列 接着如何设计RACE引物
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孙妙妙

金虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by suguolian at 2013-09-28 21:50:15
我已得到了800bp作用的序列，现根据其设计了3‘RACE的引物，用的是宝生物的3’full RACe试剂盒，可以吗？之前做了两次没成功，也不知道是什么原因。做race的引物要很靠近末端吗？一般最大距离可到多少啊？我5‘end ...

我用的是17楼的试剂盒，但是3‘没用试剂盒做，3’反转录的引物和PCR的引物都是在网上找了自己合成的，就用普通反转录试剂盒就可以了，只是把T18改成了上面合成的反转录引物。3’一般很好做的，你看下自己引物设计的是否正确，方向对不对，一般两个引物之间距离在100左右比较好。最好做完3‘再做5’效果好些，如果你想直接做应该也是可以的，我是先得到了3‘再做的5’，但我们实验室有两端一起做的。
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好好做实验！
21楼2013-10-06 10:17:14
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lyy5215211

新虫 (初入文坛)
亲  我想文献 如何找设计引物探针的目的基因  我现在在做多重PCR 想找夜歌病原体特有的一段序列 怎么找呢  求指点
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22楼2013-11-08 14:56:35
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