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wanglutasha

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相内标定量测脂肪的问题

本人最近用高效液相-质谱联用测定脂肪种类和含量,我通过质谱已经定性了二十几种甘油三酯和甘油二酯,现在想用内标对他们定量,想问下:
1. 这种多组分的测定,做标曲要用的标准品怎么选择啊,是所有出的组分的标品都需
    要吗?
2. 内标物我想选用样品中没有的一种甘油三酯,想问下内标中还需要甘油二酯吗?
3. 内标法是一定也要做标准曲线吗,能不能直接用内标物的峰面积和样品组分的面积比来换算浓度啊~?
     本人课题组都不做这块,是实验室第一人啊,什么都得自己摸索%>_<%,本人金币不多,希望各位做过的大虾们不吝赐教啊~在此谢过啦~
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wanglutasha

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-04-08 08:40:58:
1. 用液质定量,每个出峰的组分都需要标准品
2. 如果有,最好甘油三酯和二酯各一个,实在没有,只有一个甘油三酯也可以
3. 内标法建议采用标准曲线,这样方法学考察、适用性方面的数据才完整、可信

再问下大虾(看您专业是质谱分析,多请教一下,嘿嘿),我用的是安捷伦的高效液相-飞行时间质谱联用,每次进样前基线冲得比较平稳,一般在2-5x10e6左右走平,但一旦进样后,基线马上升高一个数量级,直接到2x10e7,导致很多小峰无法辨别,想问下是什么原因啊~
3楼2012-05-01 11:17:17
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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树树8013: 金币+2, 版主奖励,请继续关注食品板块。 2012-04-08 21:26:56
wanglutasha: 金币+2, 有帮助 2012-05-01 11:12:40
1. 用液质定量,每个出峰的组分都需要标准品
2. 如果有,最好甘油三酯和二酯各一个,实在没有,只有一个甘油三酯也可以
3. 内标法建议采用标准曲线,这样方法学考察、适用性方面的数据才完整、可信
梦想、激情、灵感、体验--che
2楼2012-04-08 08:40:58
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

首先切换一下两个六通阀,进样器的六通阀mainpass、bypass来回切换,质谱的六通阀to ms,to waste来回切换,看看基线有没有明显升高,如果有,那是这两个阀脏了。如果没有明显变化,那基线的升高仅是来源于你的样品
梦想、激情、灵感、体验--che
4楼2012-05-01 11:27:13
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