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wzb198910

铜虫 (小有名气)

[求助] 紫外分光光度仪绘制标准磷曲线

使用磷酸二氢钾、硫酸、钼酸铵及抗坏血酸为原料,使用紫外分光光度计绘制标准磷曲线。问:(1)空白测试是使用水还是硫酸、钼酸铵、抗坏血酸和水的混合溶液?
(2)以混合溶液为空白对照,对其它含磷溶液进行全波段扫描(190~800nm),为什么在321nm左右处出现峰值,而文献中使用的是690nm,690nm是如何确定的呢?
(3)如果进行标准曲线绘制,含磷量大概为多少?实验中我使用的是1ug/ml,不知是不是浓度过低?影响最终结果么?
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Yangge642220

铜虫 (初入文坛)

楼主你好!测磷有  磷钒钼黄光光度法 和磷钼蓝光度法两种,前一种在420nm波长下测量,后一种在700nm 也就是你说的690nm附近测量。我想你应该是选用的 磷钼蓝光度法 。
首先,给你方法提要:磷钼蓝光度法,在1.0-1.4mol/L盐酸介质中,酒石酸钾钠存在下,以乙醇为稳定剂,加入钼酸铵使磷酸根例子生成磷钼杂多酸,在用抗坏血酸将磷钼杂多酸还原为磷钼蓝,于波长700nm处进行P的测量。
其次,建议标准液ρP2O5=10ug/ml,曲线:0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 7.50 10.00ml  于50.00ml的比色管加入10ml(1+1)盐酸,1ml酒石酸钾钠400g/L,5ml钼酸铵50g/L,5ml乙醇用水稀释至30ml左右,每加一次试剂均需摇匀。然后,沸水浴5min,取下立即加入5ml抗坏血酸50g/L,摇匀。放置5-10min再上机扫描试试。
最后,空白用的是没加标准试剂的混合液。浓度比较低的话,尽量选择3cm 的比色皿。
5楼2012-05-13 02:55:24
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wsp1988

木虫 (正式写手)


ymnh: 金币+1, 积极。辛苦了 2012-04-06 18:43:31
空白测试用硫酸、钼酸铵、抗坏血酸和水的混合溶液
你是小狗!
2楼2012-04-06 15:07:28
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luoyang8780

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ymnh: 金币+1, 积极。欢迎常来 2012-04-06 22:25:53
wzb198910: 金币+2, 有帮助 2012-04-07 14:17:16
应该是在321有种什么东西也有较大吸收峰,所以用690-700,防止干扰
呵呵呵恩呵呵呵呵
3楼2012-04-06 21:17:24
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徐丁

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第1&2个问题请参考楼上答案。
标准曲线绘制由最低和最高量程的界定,直接参考环境科学出版社《水和废水监测分析方法》,网上可以查到
徐丁爱环境,爱科研,更爱生活
4楼2012-04-07 11:35:20
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