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紫外分光光度仪绘制标准磷曲线
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使用磷酸二氢钾、硫酸、钼酸铵及抗坏血酸为原料，使用紫外分光光度计绘制标准磷曲线。问：（1）空白测试是使用水还是硫酸、钼酸铵、抗坏血酸和水的混合溶液？ （2）以混合溶液为空白对照，对其它含磷溶液进行全波段扫描（190~800nm），为什么在321nm左右处出现峰值，而文献中使用的是690nm，690nm是如何确定的呢？ （3）如果进行标准曲线绘制，含磷量大概为多少？实验中我使用的是1ug/ml，不知是不是浓度过低？影响最终结果么？ |
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2楼2012-04-06 15:07:28
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楼主你好！测磷有 磷钒钼黄光光度法 和磷钼蓝光度法两种，前一种在420nm波长下测量，后一种在700nm 也就是你说的690nm附近测量。我想你应该是选用的 磷钼蓝光度法 。 首先，给你方法提要：磷钼蓝光度法，在1.0-1.4mol/L盐酸介质中，酒石酸钾钠存在下，以乙醇为稳定剂，加入钼酸铵使磷酸根例子生成磷钼杂多酸，在用抗坏血酸将磷钼杂多酸还原为磷钼蓝，于波长700nm处进行P的测量。 其次，建议标准液ρP2O5=10ug/ml，曲线：0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 7.50 10.00ml 于50.00ml的比色管加入10ml（1+1）盐酸，1ml酒石酸钾钠400g/L，5ml钼酸铵50g/L，5ml乙醇用水稀释至30ml左右，每加一次试剂均需摇匀。然后，沸水浴5min，取下立即加入5ml抗坏血酸50g/L，摇匀。放置5-10min再上机扫描试试。 最后，空白用的是没加标准试剂的混合液。浓度比较低的话，尽量选择3cm 的比色皿。 |
5楼2012-05-13 02:55:24
Yangge642220
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