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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体问题
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anxiuhong

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗体问题

大家好，最近找公司做了一个抗体，发现抗体显示的带不是我的目的条带，图片上面是SDS-PAGE染色的胶，下面是Westen的片子，点样顺序在图片下方，我的蛋白是拟南芥总蛋白，我的目的带是38kd。想问一下SDS中最亮的那条大约55kD的带是什么东西，并且western检测的条带也大约是55kd的，我觉得就是SDS上的那条最亮的带，请问是抗体不特异造成的吗？还是其他原因？谢谢！

上面：SDS-PAGE  下面：Western blot
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1楼 2012-04-06 12:16:30
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anxiuhong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-04-06 12:35:29:
你在SDS-PAGE 标记一下靶带的位置

我的图片Marker标记的大小没有完全显示，SDS-PAGE图片最右边是fermentas的彩虹marker，从上到下箭头所指为100,70,55,40kd,我的靶蛋白应该就在最下面那个箭头附近，最左边是easysee marker。western图片最右边是easysee  marker，箭头应该是40kd的位置，4和5之间的marker是fermentas的彩虹marker，我每次显影都只能显出100和70kd的带，比较上下两张图片我觉得显出来的带差不多是55的带
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5楼2012-04-06 14:37:26
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
你在SDS-PAGE 标记一下靶带的位置
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2楼2012-04-06 12:35:29
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是抗体重链吧..........
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3楼2012-04-06 13:14:47
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qjy_134

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ＳＤＳ上最亮的死５５ＫＤ,不是你的靶带了？　这样的话你免疫的蛋白不纯，下面最粗的也是５５ＫＤ位置蛋白。
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4楼2012-04-06 13:32:06
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