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anxiuhong

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗体问题

大家好,最近找公司做了一个抗体,发现抗体显示的带不是我的目的条带,图片上面是SDS-PAGE染色的胶,下面是Westen的片子,点样顺序在图片下方,我的蛋白是拟南芥总蛋白,我的目的带是38kd。想问一下SDS中最亮的那条大约55kD的带是什么东西,并且western检测的条带也大约是55kd的,我觉得就是SDS上的那条最亮的带,请问是抗体不特异造成的吗?还是其他原因?谢谢!

上面:SDS-PAGE  下面:Western blot
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


anxiuhong: 金币+1, 有帮助 2012-04-07 10:06:51
引用回帖:
9楼: Originally posted by anxiuhong at 2012-04-06 15:19:52:
那就是说如果这显示的是重链的话,那么我的抗体不是完整的了,也就不能标记我的靶蛋白了?那怎么才能消除重链轻链呢?谢谢!

试图搞清楚原因,这个抗体是怎么表达出来的,杂交瘤表达的?公司交付抗体时候有什么qc数据吗
western用的什么二抗?
10楼2012-04-06 16:08:23
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


你在SDS-PAGE 标记一下靶带的位置
2楼2012-04-06 12:35:29
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是抗体重链吧..........
3楼2012-04-06 13:14:47
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
SDS上最亮的死55KD,不是你的靶带了? 这样的话你免疫的蛋白不纯,下面最粗的也是55KD位置蛋白。
4楼2012-04-06 13:32:06
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