应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PBI121载体转化拟南芥，Tail-PCR扩增整合位点侧翼序列，为何只扩增得到载体部分序列？
172/2返回列表上一页12
查看: 3164  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dfm1987 at 2012-04-14 10:20:27
谢谢！但是我扩增的方向好像没有错，是往RB区域以外扩增的，但是得到1000bp左右的RB上游载体序列，没有得到植株基因组的序列...

我目前也遇到了同样的问题，第三轮特异条带大概是3kb,但是没有植物基因组的信息，都是载体信息，也是RB外侧基因，有些文献报道可能是骨架确实是插入到植物染色体中，可以根据已知的序列继续设计引物TAIL，
赞一下 回复此楼
11楼2013-05-10 11:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qin.xiaoyue

铁虫 (初入文坛)
我用的是pPZPY122载体，也是遇到相同的情况，从RB向外设计的引物，测序得到的结果却是RB上游的结果。同求高人指点。
赞一下 回复此楼
12楼2014-01-10 14:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnsdtlf

新虫 (初入文坛)
我现在也在做PB121的插入位点侧翼序列分析，困惑的是我现在无法确认RB与LB的序列，因此也不能设计特异引物，可不可以告诉我两侧的侧翼序列？急求
赞一下 回复此楼
13楼2014-03-20 11:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnsdtlf

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

求助PB121的两侧LB与RB序列
赞一下 回复此楼
14楼2014-03-20 11:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0405lanfeng

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lzh860801 at 2012-04-10 17:10:04
lz你的情况和我很相似啊
我是设计的LB的引物 然后调到了载体内部去了
序列比对的时候发现NCBI上面PBI121这个载体有几个修改过的 它们的LB RB是反的 所以我目前把引物反过来设计准备重新调了

有结果了吗？我也是 扩出来的都是载体序列

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
15楼2014-03-20 13:25:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

本田透1990

金虫 (小有名气)
我现在遇到了和你相同的问题，怀疑不止一个T-DNA插入，楼主你的问题解决了吗
赞一下 回复此楼
16楼2014-07-27 22:07:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夜卧听风吹雨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 虫子火箭兵 at 2013-05-10 11:17:21
我目前也遇到了同样的问题，第三轮特异条带大概是3kb,但是没有植物基因组的信息，都是载体信息，也是RB外侧基因，有些文献报道可能是骨架确实是插入到植物染色体中，可以根据已知的序列继续设计引物TAIL，...

你好，请问你后来问题解决了吗？我现在也遇到这个问题，是载体骨架也插入到植物基因组中去了吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
17楼2017-11-26 11:01:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dfm1987 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:14 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:02 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:25 by mibUvS8DDCwf
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:21 by mibUvS8DDCwf
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:12 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:57 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭