应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达
51/1返回列表
查看: 1653  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Pushing2012

金虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达

最近表达了个蛋白，用的Pet30做载体，目标蛋白41kDa,IPTG诱导后SDS-PAGE检测在36kDa出现明显新的条带，空白菌和表达菌都在41kda有条带，镍柱纯化后得到的蛋白在41kDa,这个让我无法理解，为什么跑胶时新出现的蛋白在36kDa，而纯化出的蛋白在41kDa。 做酶活测试没有活性，请问在做酶活测试时有没有什么注意事项！请高人赐教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-03-31 09:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Pushing2012

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by churchill87426 at 2012-03-31 18:02:57:
LZ的36KDa和41KDa的蛋白位置差别大么？纯化后的蛋白有没有Western检测下是不是目标蛋白？是变性纯化还是Native纯化？纯化过程尽量都在4度操作。

Native的啊！都是4度操作的
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-31 22:18:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

whb21

木虫 (著名写手)
★
Pushing2012(金币+1): 谢谢参与
这个确实有点诡异，建议你做个ELISA看看表达出来的蛋白是不是你要的，
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-31 10:08:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
Pushing2012(金币+1): 谢谢参与
表达的蛋白是在上清吗？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-31 14:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunwei57

木虫 (小有名气)
★
Pushing2012(金币+1): 谢谢参与
全程低温操作,建议重新跑胶检测 你的蛋白
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-31 16:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
Rosy_yidun13楼
2012-04-01 10:13   回复  
Pushing2012(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币-10, 广告 2012-04-01 18:06:42
西瓜: 编辑内容 2012-04-01 18:06
-- [ Last edited by 西瓜 on 2012-4-1 at 18:06 ]
Rosy_yidun14楼
2012-04-01 10:14   回复  
西瓜: 编辑内容 2012-04-01 18:06
-- [ Last edited by 西瓜 on 2012-4-1 at 18:06 ]
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭