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hlwnxfd2011银虫 (小有名气)
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[求助]
RT-PCR
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| 最近做了RT-PCR，PCR产物呈弥散状？请教解决办法？望哪位前辈指教一下！感激不尽！ |
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wtyyyyy1988
铁杆木虫 (正式写手)
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2楼2012-03-27 18:32:00
hlwnxfd2011
银虫 (小有名气)
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3楼2012-03-27 19:01:36
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励热心应助！ 2012-03-28 10:41:51
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这里有答案：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3067846&fpage=1&page=1 摘取部分供参考： 镁离子、dNTP、引物、模板、酶太多，退火温度过低，都可能产生弥散，有时候引物质量不好也可能，通常我们p的时候镁离子、dNTP、引物、酶的量都是基本不变的，主要还是考虑模板浓度和引物的质量 1，模板浓度可能太大，建议稀释； 2，引物特异性不好，建议多设计几对引物进行扩增； 3，buffer和引物得等在冰上溶解后再使用； 还有人提到可能是延伸时间太长 如果还是分析不出问题，可以把图贴上来大家帮忙再看看 |
4楼2012-03-27 22:35:46