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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 重叠延伸PCR引物合成求助
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by tyw2623 at 2012-03-25 21:18:16:
overlapPCR

感谢
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11楼2012-03-26 17:12:01
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mrchen8903

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 生物一点点 at 2012-03-25 19:22:06
有需要的话可以把具体序列发过来，给你设计 了试试哦

请问你会设计重叠延伸PCR的引物吗？小弟刚接触分子，真心求助。最近老师让做融合蛋白，能帮我设计下引物吗？可以加金币的~
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12楼2013-06-30 22:07:21
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
你好，怎么让基因1下游引物和基因2 上游引物有重叠啊，基因1 下游3“端含有20bp的基因2 5”端序列还是还有基因2 上游引物？
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13楼2013-09-02 13:13:52
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-03-24 16:16:08
就是搭桥PCR。设计引物时A片段3‘端取20bp左右的碱基，B片段5’端取20个碱基左右，总碱基不要超过50bp（大于50公司合成会比较贵），同时合成该引物反向互补片段。
用这条引物跟B片段的反向引物扩增B片段。再用这条 ...

可理解为：基因1 下游引物3“端含有基因2约20bp的5”端序列吗？同理基因2的上游引物是含有基因1的3”端20bp的序列？谢谢
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14楼2013-09-02 13:18:42
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qsx04152006

木虫 (知名作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by tyw2623 at 2012-03-25 21:18:16
overlapPCR

能不能写个单链的引物设计看看，另外，基因1的5“端怎么是基因A的序列啊，同理基因2的下游引物怎么纯粹是基因2的3”端序列啊，另外基因1下游引物怎么看不懂啊，
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15楼2013-09-02 13:27:03
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by qsx04152006 at 2013-09-02 13:18:42
可理解为：基因1 下游引物3“端含有基因2约20bp的5”端序列吗？同理基因2的上游引物是含有基因1的3”端20bp的序列？谢谢...

可以这么理解。
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hehe
16楼2013-09-03 21:42:04
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