24小时热门版块排行榜    

查看: 1071  |  回复: 2

风寒一剑

银虫 (正式写手)

[交流] qPCR的标准品 已有2人参与

请教一下,针对某个目的基因(nifH),DGGE电泳后切胶回收连接质粒,转化大肠杆菌,筛选阳性克隆测序,请问这个阳性克隆(假设通过BLAST确定了种属)的质粒DNA能否用作定量PCR(qPCR)的标准样品梯度稀释制作标准曲线?我看有些文献这样做,而更多的文献是用采用别的方法,请教各位做过的,上面的方法可行否?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilinlin123

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以 我看到过很多文献都是这么做
2楼2012-03-24 10:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2010203011

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你测序之后blast之后的各个参数怎样?因为DGGE之前的PCR会有一定的错配率吧,不是说阳性克隆就可以咯,至少在有效参数之内吧?
3楼2012-03-24 21:45:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 风寒一剑 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见