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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎么配制2%的溶菌酶溶液
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)

[求助] 怎么配制2%的溶菌酶溶液

2%的溶液我本身用的蒸馏水配制，然后放在冰箱里冷藏，但学姐说这样会失活，
而且不能在冰箱中放置时间很久，要用磷酸缓冲液配，求下磷酸缓冲液怎么配啊
拜托了，谢谢~
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加油 坚持
1楼 2012-03-22 09:14:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
据分子克隆和个人经验，溶菌酶发挥最大活性需要pH8.0，所以一般用TE配制，但用纯水配制也能使用。配好的溶菌酶分装冻存（我冻在-80），每次取用一管，用完即弃，不能反复冻融。
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zjm麦子
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2012-03-22 11:39:11
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普通回帖

gold_like

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjm麦子: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢啦 2012-03-22 22:35:47
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-03-23 14:37:06
磷酸盐缓冲液 （PBS，0.03mol/L，pH7.2）
无水磷酸氢二钠                    2.83g
磷酸二氢钾                        1.36g
蒸馏水加至                        1000ml
将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调  pH  至 7.2～7.4，于 121℃ 压力蒸气灭菌 20min备用。
(来自《消毒技术规范》）
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zjm麦子
2楼2012-03-22 10:32:15
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjm麦子: 金币+2, ★有帮助, 谢谢啦 2012-03-22 22:35:24
溶菌酶溶液以前都是-20度放置，避免反复冻融，一个月用起没什么问题耶
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2012-03-22 11:19:44
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-03-22 11:39:11:
据分子克隆和个人经验，溶菌酶发挥最大活性需要pH8.0，所以一般用TE配制，但用纯水配制也能使用。配好的溶菌酶分装冻存（我冻在-80），每次取用一管，用完即弃，不能反复冻融。

谢谢啦！
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加油 坚持
5楼2012-03-22 22:29:24
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by j2 at 2012-03-22 11:19:44:
溶菌酶溶液以前都是-20度放置，避免反复冻融，一个月用起没什么问题耶

我们也有说-20度放置，也有说2——8摄氏度放置的，所以现在还是不确定……不过谢谢啦~
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加油 坚持
6楼2012-03-22 22:30:21
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by gold_like at 2012-03-22 10:32:15:
磷酸盐缓冲液 （PBS，0.03mol/L，pH7.2）
无水磷酸氢二钠                    2.83g
磷酸二氢钾                        1.36g
蒸馏水加至                        1000ml
将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中，待 ...

首先，谢谢你的帮助，我查阅到的资料说溶菌酶在酸性条件下可以存在，碱性条件下不可以存在，最适PH是6.5
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加油 坚持
7楼2012-03-22 22:35:04
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2012-03-22 11:39:11:
据分子克隆和个人经验，溶菌酶发挥最大活性需要pH8.0，所以一般用TE配制，但用纯水配制也能使用。配好的溶菌酶分装冻存（我冻在-80），每次取用一管，用完即弃，不能反复冻融。

谢谢啦~不过，我就只是见过在-20度和2——8度的，没有见过那么低的~我查的活性最大是PH6.5
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加油 坚持
8楼2012-03-22 22:37:13
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陆陆lulua

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-29 13:54:24
我用试剂盒提DNA,也配过溶菌酶，将它溶在Tris-HCl 中，放入-20°

冰箱，可以反复使用。但我做的时候直接将它溶在ddH2O中。酶很好溶的。
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啦啦啦
9楼2012-03-23 10:53:19
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zjm麦子

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 陆陆lulua at 2012-03-23 10:53:19:
我用试剂盒提DNA,也配过溶菌酶，将它溶在Tris-HCl 中，放入-20°

冰箱，可以反复使用。但我做的时候直接将它溶在ddH2O中。酶很好溶的。

恩 谢谢啦~可以反复使用这个问题还不确定 我是把ly粉末在-20度存放，可溶液就只冷藏~不知道溶液中LY会不会失活，而且可不可以反复用~~
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加油 坚持
10楼2012-03-23 23:52:48
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