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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
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jingyi_180

银虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaoyong1982 at 2012-03-23 11:21:40:
地下水中微生物不多，所以多取水样，滤膜过滤，然后用滤膜提DNA，以前这样收集过油田微生物；

DNA提取可以用试剂盒或者CTAB法，试剂盒国产的细菌基因组DNA提取试剂盒就可以，比如百泰克的，记得要蛋白酶K，也可 ...

关于水样的采集和微生物收集我还不知道，你那边有滤膜法的详细步骤么？我自己以前做化学，没接触过这个，希望你可以帮我~~试剂盒我这边在公司定了一个，就是omega的提取细菌总DNA的，应该没问题吧？
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11楼2012-03-23 14:17:31
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用这个试剂盒吧，提取效率很高的，我们实验室一直在用。估计能满足你的要求
Mo Bio Power Soil DNA isolation kit
(MO BIO Laboratories, Inc., Carlsbad, CA).
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
12楼2012-03-23 14:38:10
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jingyi_180

银虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-03-23 14:38:10:
用这个试剂盒吧，提取效率很高的，我们实验室一直在用。估计能满足你的要求
Mo Bio Power Soil DNA isolation kit
(MO BIO Laboratories, Inc., Carlsbad, CA).

O(∩_∩)O谢谢，这个试剂盒哪里有卖？
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13楼2012-03-23 14:49:37
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xiaoyong1982

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2012-03-23 16:23:53
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by jingyi_180 at 2012-03-23 14:49:37:
O(∩_∩)O谢谢，这个试剂盒哪里有卖？

好像是北京有代理商的，如果你想买的话，我给你去问问我们实验室采购试剂的，她有电话的。
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
15楼2012-03-23 23:46:51
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jingyi_180

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-03-23 23:46:51:
好像是北京有代理商的，如果你想买的话，我给你去问问我们实验室采购试剂的，她有电话的。

嗯，好的，你帮我问问哇~~~
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16楼2012-03-24 15:17:40
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luocongqiang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaoyong1982 at 2012-03-23 11:21:40:
地下水中微生物不多，所以多取水样，滤膜过滤，然后用滤膜提DNA，以前这样收集过油田微生物；

DNA提取可以用试剂盒或者CTAB法，试剂盒国产的细菌基因组DNA提取试剂盒就可以，比如百泰克的，记得要蛋白酶K，也可 ...

请问下过水样的时候要在无菌工作台上吗 还是平常工作台上就可以吗
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17楼2012-03-27 15:21:37
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vszhang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐常在 at 2012-03-22 18:24:16:
我觉得如果水中菌体足够的话，可以尝试直接离心收集菌体，再用玻璃珠法或者SDS法或者CTAB法提取基因组，都是比较常用的方法，CTAB法可能在植物中比较常用。如果菌体不是很多的话，可以先将一定量的水温育3-5个小时 ...

我也是赞成用离心收集，但最好用差速离心，第一次离心先离掉一些比较大的颗粒，再富集细菌，后面的提核酸的步骤可以选用KIT或用CTAB等等。但我觉得最主要的还是要收集到足够的细菌，用大容量的离心机多离几次。
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启蒙的恩师是‘神拳泰斗’刘虎刘老爷子，然后是‘无敌刀’杨斌杨二爷子、‘一枪刺九龙’赵广赵老师、‘神刀铁胳臂’胡得杨胡大爷
18楼2012-03-27 21:30:02
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0609michael

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐常在 at 2012-03-22 18:24:16:
我觉得如果水中菌体足够的话，可以尝试直接离心收集菌体，再用玻璃珠法或者SDS法或者CTAB法提取基因组，都是比较常用的方法，CTAB法可能在植物中比较常用。如果菌体不是很多的话，可以先将一定量的水温育3-5个小时，

先将一定量的水温育3-5个小时
請問溫度是多少? 謝謝
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19楼2012-05-23 17:03:59
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0609michael

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐常在 at 2012-03-22 18:24:16:
我觉得如果水中菌体足够的话，可以尝试直接离心收集菌体，再用玻璃珠法或者SDS法或者CTAB法提取基因组，都是比较常用的方法，CTAB法可能在植物中比较常用。如果菌体不是很多的话，可以先将一定量的水温育3-5个小时，

可以先将一定量的水温育3-5个小时
請問溫度是幾度?
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20楼2012-05-23 17:04:55
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