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jingyi_180

银虫 (正式写手)

[求助] 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法 已有1人参与

各位大侠,现在有没有成熟的水中细菌DNA提取的试剂盒卖?
如果没有,自己做的话,比较好的方法有哪些?
那位大侠做过类似工作,急切需要帮助。
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vszhang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 快乐常在 at 2012-03-22 18:24:16:
我觉得如果水中菌体足够的话,可以尝试直接离心收集菌体,再用玻璃珠法或者SDS法或者CTAB法提取基因组,都是比较常用的方法,CTAB法可能在植物中比较常用。如果菌体不是很多的话,可以先将一定量的水温育3-5个小时 ...

我也是赞成用离心收集,但最好用差速离心,第一次离心先离掉一些比较大的颗粒,再富集细菌,后面的提核酸的步骤可以选用KIT或用CTAB等等。但我觉得最主要的还是要收集到足够的细菌,用大容量的离心机多离几次。
启蒙的恩师是‘神拳泰斗’刘虎刘老爷子,然后是‘无敌刀’杨斌杨二爷子、‘一枪刺九龙’赵广赵老师、‘神刀铁胳臂’胡得杨胡大爷
18楼2012-03-27 21:30:02
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xht

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-23 08:37:02
应该可以用细菌滤膜过滤这些水,然后再用细菌滤膜来提取吧。试剂盒我没有接触过

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2楼2012-03-22 16:43:05
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快乐常在

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-22 22:19:28
我觉得如果水中菌体足够的话,可以尝试直接离心收集菌体,再用玻璃珠法或者SDS法或者CTAB法提取基因组,都是比较常用的方法,CTAB法可能在植物中比较常用。如果菌体不是很多的话,可以先将一定量的水温育3-5个小时,再按前面讲的方法抽提,应该是可以抽出来的。可以试试。

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3楼2012-03-22 18:24:16
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王巧凤

木虫 (正式写手)

想改名未遂

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-23 08:37:13
CTAB完全可以的,我是用的这个,基本上每次都能提出来

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活的大气些
4楼2012-03-22 20:53:50
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