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辅酶Q提取
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| 各位大侠,谁做过辅酶Q(泛醌)的提取,方法是什么。我现在用的甲醇/丙酮法提取,效果不是太好。 |
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(1) 在 250ml 圆底烧瓶中加入 20~25g 湿菌体,然后加入 2.5~4g 焦性没石子酸,最后加入 100ml 10%(W/V)的碱甲醇。 (2) 接上回流管,在沸水浴中回流 30min,回流结束后迅速用自来水冷却至 室温度。 (3) 将皂化液转移入 200ml 离心瓶中,5000rpm 离心 10min,去除底部沉淀物留上清液。 (4) 将上清液每次以 40ml 石油醚或正己烷萃取,5000rpm 离心 15min 以分层,连续萃取三次。 (5) 合并萃取液反复用水洗至中性,并加入 5g 无水硫酸钠干燥液体。 (6) 将萃取液转移至 250ml 圆底烧瓶中用薄膜蒸发器减压浓缩,水浴温度控 制在 55~60℃,待萃取液浓缩至 1ml 左右停止浓缩。 (7) 将浓缩液收集至 5ml 离心管中于-20℃放置 2 小时(或过夜),离心去除沉淀物。 (8) 离心后的上清液继续以薄膜蒸发器减压浓缩,直至蒸干,浓缩时水浴温 度控制在 60℃以内。 (9) 趁热以数滴无水乙醇将油状物转移至 EP 管中,-20℃静置过夜结晶。 |
5楼2012-03-24 10:20:48









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