应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR时出现了非目的片段的超大片段条带
172/2返回列表上一页12
查看: 3428  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiao7270

至尊木虫 (著名写手)
如果是从基因组里克隆已知基因片段，只要引物没错，扩增条件合适，一定能扩增出来。如果是鉴定是否具有插入片段，你的胶上没有一个有目的片段。
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-19 09:58:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhcosa

金虫 (小有名气)
是基因组DNA吧，没有目的带。稀释一下。
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-19 10:32:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feier5168

金虫 (小有名气)
我觉得你这是模板条带吧。
赞一下 回复此楼
奋斗啊
13楼2012-03-19 11:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdengmin

木虫 (著名写手)
个人觉得延伸时间没必要延长，我们实验室taq酶的延伸速度是2k/min，建议楼主将延伸的温度跑个梯度，模板也可试试梯度，确定最适浓度，还有就是引物二聚体挺亮的。
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-19 21:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我叫路人甲

银虫 (小有名气)
模板吧？？？
回复此楼
15楼2012-03-21 01:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yunbfly

木虫 (小有名气)
确定是不是模板，电泳时点上同等量的模板做个对照就知道了。
不过，我之前也出现过也很不好扩、不稳定的案例：2条带，一条目的长度，一条非目的长度，全部测序发现，意外发现另一个长度条带也是同一个基因，只是上游调控序列短了许多。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-03-21 08:57:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dafeizizhu

铜虫 (小有名气)
我觉得除了模板浓度的问题，可能造成模板在电泳图中显示。另外，我觉得引物是不是设计的合理。同样的引物，有两个作用模板也会出现上面的情况。大片段的合成慢，小片段合成速度快，在同样的时间里，小片段合成的浓度就大，电泳出来亮度就高
赞一下 回复此楼
17楼2012-06-29 12:04:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 恶魔眼球 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭