【答案】应助回帖

这世界上有三样东西是别人抢不走的：一是胃里吃紧的东西，二是藏在心里的梦想，三是读进大脑的书！！！

11楼2012-03-19 07:15:45

qidannvzi

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5楼: Originally posted by wangdezhou84 at 2012-03-18 20:19:28:
祝福

谢谢了，你也是，实验顺利！

准备跨新年！

12楼2012-03-19 08:18:19

qidannvzi

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8楼: Originally posted by hxl4054 at 2012-03-18 23:33:43:
这个我不懂没金币了给偶发站内信给你赞助哈

呵呵，好人那，谢谢啊，没事，我慢慢攒！

准备跨新年！

13楼2012-03-19 08:21:31

DARKSEA2522

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qidannvzi: 回帖置顶 2012-03-19 13:34:36

送花祝福，祝心情会好起来！

14楼2012-03-19 09:20:16

qidannvzi

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14楼: Originally posted by DARKSEA2522 at 2012-03-19 09:20:16:
送花祝福，祝心情会好起来！

谢谢了！

准备跨新年！

15楼2012-03-19 13:34:56

yj507

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【答案】应助回帖

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qidannvzi: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-03-20 08:06:38

这个影响因素比较多哦
DNA纯度、起始量，
引物设计，
退火温度，
酶的选择，
或者dNTP浓度不小心使用过高了可能都会导致PCR没东西

16楼2012-03-19 16:00:37

harbor2010

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qidannvzi: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-03-20 08:06:46

我们用的50ul的体系
上下游各1ul
Temple 1ul

17楼2012-03-19 16:35:40

孙启亮

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qidannvzi: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-03-20 08:06:56
西瓜: 金币+2, 鼓励应助！荧光定量太贵了，有点不划算哈~ 2012-03-20 11:56:33

建议你做个温度梯度PCR，同时对你的引物做下primer-blast验证引物特异性。如果还弄不出来，你仔细检查下步骤不会是跑胶忘加EB了吧？实在没结果的话你还可以做下荧光定量PCR，看看扩增曲线怎么样，这样可以实时监测你的PCR产物

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18楼2012-03-19 22:33:35

whb21

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

做PCR有时候还真的要看人品，祝你人品早点爆发

19楼2012-03-20 09:34:27

若水5886

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【答案】应助回帖

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西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-20 11:56:44

1 如果是引物的问题，那么你就要从设计的引物中筛选出扩增结果稳定，条带清晰，有多态性的引物
2 如果是PCR的条件问题，那么你就要看下退火温度是否合理，有没有需要加入Mg离子来提高反应的效率
3 如果是样品本身的问题，那么你说DNA是没有问题的，有DNA，但是能否确认标记上了，并且具有这种多态性，还有加样做PCR的时候是不是忘了加模板或者没加到体系里去？

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20楼2012-03-20 09:41:46