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remona

新虫 (初入文坛)

[交流] 2D高手，请指教啊！万分感谢！ 已有1人参与

肿瘤细胞
收集细胞，离心，加入裂解液冰中裂解，超声，加入核酸酶，提取30min，-20度丙酮沉淀
过夜，20000转离心0.5h，裂解液复溶，40000转超离0.5h，上样。
胶条：7cm，PH 3-10，搭盐桥。 上样量200 ?g，130 ?l

第一向条件：

水化12 h（18℃）主动水化（50V）

S1 250V线性30 min

S2 1000V快速 1h 30 min
S3 4000V线性3 h

S4 4000V快速19000伏小时

第二向条件：80 V 10 min ，120 V 1 h50min
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1楼 2012-03-16 09:40:50
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remona

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liutingwu at 2012-03-16 12:05:04:
不是高手，纯个人意见：二向跑的有点快了，点呈水滴状，也可能胶的孔隙度有点大，可考虑加大一点甲叉和丙烯酰胺的浓度，纵向条纹是不是样品杂质的问题，或者，溶解度差异导致样品在二向中有给沉淀了……

那酸性端的那些大的点呢，怎么去掉？
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4楼2012-03-17 09:36:39
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remona

新虫 (初入文坛)
这是我做的图片。请指教！

中药



对照
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2楼2012-03-16 09:45:42
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liutingwu

金虫 (初入文坛)
★ ★
tuobaohua: 金币+2, 积极应助，欢迎常来科研版！ 2012-03-16 12:06:28
不是高手，纯个人意见：二向跑的有点快了，点呈水滴状，也可能胶的孔隙度有点大，可考虑加大一点甲叉和丙烯酰胺的浓度，纵向条纹是不是样品杂质的问题，或者，溶解度差异导致样品在二向中有给沉淀了……
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3楼2012-03-16 12:05:04
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