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remona

新虫 (初入文坛)

[交流] 2D高手,请指教啊!万分感谢! 已有1人参与

肿瘤细胞
收集细胞,离心,加入裂解液冰中裂解,超声,加入核酸酶,提取30min,-20度丙酮沉淀
过夜,20000转离心0.5h,裂解液复溶,40000转超离0.5h,上样。
胶条:7cm,PH 3-10,搭盐桥。 上样量200 ?g,130 ?l

第一向条件:

水化12 h(18℃)主动水化(50V)

S1 250V线性30 min

S2 1000V快速 1h 30 min
S3 4000V线性3 h

S4 4000V快速19000伏小时

第二向条件:80 V 10 min ,120 V 1 h50min
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remona

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liutingwu at 2012-03-16 12:05:04:
不是高手,纯个人意见:二向跑的有点快了,点呈水滴状,也可能胶的孔隙度有点大,可考虑加大一点甲叉和丙烯酰胺的浓度,纵向条纹是不是样品杂质的问题,或者,溶解度差异导致样品在二向中有给沉淀了……

那酸性端的那些大的点呢,怎么去掉?
4楼2012-03-17 09:36:39
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remona

新虫 (初入文坛)

这是我做的图片。请指教!

中药



对照

2楼2012-03-16 09:45:42
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liutingwu

金虫 (初入文坛)

★ ★
tuobaohua: 金币+2, 积极应助,欢迎常来科研版! 2012-03-16 12:06:28
不是高手,纯个人意见:二向跑的有点快了,点呈水滴状,也可能胶的孔隙度有点大,可考虑加大一点甲叉和丙烯酰胺的浓度,纵向条纹是不是样品杂质的问题,或者,溶解度差异导致样品在二向中有给沉淀了……
3楼2012-03-16 12:05:04
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