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zyw_821212

新虫 (初入文坛)

[求助] RNAi

有哪位做过RNAi载体构建的，两段RNAi 片段插到intron的两边有方向性吗？
如果RNAi与Promoter之间有一小段其他杂序列，影响转化后的干扰吗？
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1楼 2012-03-13 17:58:21
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lawk00

铜虫 (小有名气)
这个好像没有要求，只要根据载体的要求设计好引物就可以了。
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5楼2012-03-16 15:36:33
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流！ 2012-03-13 23:54:10
zyw_821212(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-14 17:04:38
两段RNAi片段的方向是相对的，比如序列为第一段为atcg，另一段插入时应为cgat以保证转录为RNA时可以形成双链结构。启动子与RNAi之间有一小段在序列一般不会影响转化后的干扰。
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hehe
2楼2012-03-13 20:35:27
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zyw_821212

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by lvbobo823 at 2012-03-13 20:35:27:
两段RNAi片段的方向是相对的，比如序列为第一段为atcg，另一段插入时应为cgat以保证转录为RNA时可以形成双链结构。启动子与RNAi之间有一小段在序列一般不会影响转化后的干扰。

非常感谢，你所指的相对是方向都向着intron还是方向背离intron还是都可以？
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3楼2012-03-14 17:04:02
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zyw_821212 at 2012-03-14 17:04:02:
非常感谢，你所指的相对是方向都向着intron还是方向背离intron还是都可以？

方向都可以。只要形成双链RNA就可以
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hehe
4楼2012-03-15 08:01:50
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