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参考参考Turesny i等( 2000) 及Takahama 和Onik i ( 1992) 提供的方法测定果实中抗坏血酸含量，酶液的粗提取：称取约0.5 g 鲜样在5% 的偏磷酸中研磨匀浆, 于4 ℃ 13000 rpm离心20m in, 收集上清液用于测定A sA 和DHA的含量。 ASA含量的确定：测定AsA 时, 吸取100 μL的上清液加入2 mL 100mmol/ L磷酸钾缓冲 液( pH 6.8) 中, 当加入1 U 的抗坏血酸氧化酶( EC 11033, 来自Cucurbitasp ) 后记录265 nm下的吸光值变化。 DHA含量测定：测定DHA 时, 吸取等量的上清液加入2mL 100mmol/ L - 1磷酸钾缓冲液( pH 6.8)中, 当加入2mmol/L DTT后开始记录265 nm下的吸光值变化。 同时用一系列已知浓度的AsA 和DHA ( Sigma公司) 溶液用相同的方法测定吸光值, 作标准曲线以计算样品中AsA、DHA 和A sA +DHA 含量。 请问标准曲线怎么做啊？是吸光度单位时间内的变化与ASA浓度的曲线图么？最后怎么算样品中ASA、DHA的含量？这个方法的原理到底是怎样的啊？鄙人比较菜，还望高人详细讲解，并指点一二，万分感激。 |
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