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山寨马克思

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助

参考参考Tures􀀂ny i等( 2000) 及Takahama 和Onik i ( 1992) 提供的方法测定果实中抗坏血酸含量,酶液的粗提取:称取约0.5 g 鲜样在5% 的偏磷酸中研磨匀浆, 于4 ℃ 13000 rpm离心20m in, 收集上清液用于测定A sA 和DHA的含量。
ASA含量的确定:测定AsA 时, 吸取100 μL的上清液加入2 mL 100mmol/ L磷酸钾缓冲
液( pH 6.8) 中, 当加入1 U 的抗坏血酸氧化酶( EC 1􀀂10􀀂3􀀂3, 来自Cucurbitasp􀀂 ) 后记录265 nm下的吸光值变化。
DHA含量测定:测定DHA 时, 吸取等量的上清液加入2mL 100mmol/ L - 1磷酸钾缓冲液( pH 6.8)中, 当加入2mmol/L DTT后开始记录265 nm下的吸光值变化。
同时用一系列已知浓度的AsA 和DHA ( Sigma公司) 溶液用相同的方法测定吸光值, 作标准曲线以计算样品中AsA、DHA 和A sA +DHA 含量。


请问标准曲线怎么做啊?是吸光度单位时间内的变化与ASA浓度的曲线图么?最后怎么算样品中ASA、DHA的含量?这个方法的原理到底是怎样的啊?鄙人比较菜,还望高人详细讲解,并指点一二,万分感激。
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