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314243568

银虫 (小有名气)

[求助] 2D二相电泳能不能做zymogram实验?

实验目的:分离目的菌株胞外分泌的目的蛋白做序列测定
目的蛋白:xylanases,是降解木聚糖的酶系
想法:2D时样品特殊处理,2D结束染色步骤用复性液复性酶活,用刚果红染色2D胶,检测出含有木聚糖酶活性的点,然后挖点做序列测定。

之前做了SDS胶的zymogram实验,实验是成功的,我想请问下有没有先行人有这方面的经验。

补充:有文献做出等电聚焦的zymogram,长时间电泳貌似也不影响酶的复性(我做过,12小时以内的电泳)。

[ Last edited by 314243568 on 2012-3-11 at 13:40 ]
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